[发明专利]PDE4DIP基因在急性心梗早期检测试剂盒中的应用

说明书

本发明公开的PDE4DIP基因在急性心梗早期检测试剂盒中的应用，本发明设计和实验验证了合适长度的核酸探针能够在很短的时间内的检测心血管疾病疾病状态下基因心梗和心衰早期发病情况，以此项技术设计的试剂盒可以用于心血管疾病的早期快速诊断，当血管内皮细胞获心肌细胞处于异常血流压力，高血脂蛋白或心肌细胞受损细胞紧张时，通过检测血液中心肌肌钙蛋白的磷酸化情况和心肌细报钙离子通道变化的情况，以及联合检测其他传通的心梗心衰诊断标志物如肌红蛋白通路上分子的变化，可以早期诊断和预测心学管疾病特别是心梗和脑梗的风险。

技术领域

本发明属于生物学检测技术领域，特别涉及PDE4DIP基因在急性心梗早期检测试剂盒中的应用。

背景技术

临床上目前主要检测血浆MPO水平与心血管异常的发生情况如心梗，脑梗和死亡的关系，此外还有肌钙蛋白，肌红蛋白和肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK—MB))等等，此类生物标记物主要发生在心肌受损和心学管症状的临床中晚期，对于心血管疾病的早期，目前尚无有效特异的早期心血管疾病的诊断方法和生物标记物。而且，检测的方法还是以酶联免疫标记和免疫发光技术为主，缺乏新颖的基因分子生物学方法。

目前酶联免疫标记和免疫发光技术的主要问题是特异性不够高，此外，肌钙蛋白，肌红蛋白和肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK—MB))等标记物只能够检测到中晚期的病人，对早期心梗缺少有效性和特异性，况且检测的手断很难做到床边诊断POCT。

按照常规的方法,如果要测定心梗心衰的分子诊断标志物的话，如果是传统的肌红蛋白肌钙蛋白等标志物的话，必须到大医院去拥有免疫发光设备的科室，患者从家里走到医院，可能会耗时一个小时或者半个小时。如果要测定PDE4DIP这样的核酸标志物的话，需要三个小时以上的qPCR进行扩增方法，对于心梗心衰这样极性的致死性疾病来说，显然是缺乏时效性,因此，急需一种快速,简便和能做基层操作和实施的方法。

发明内容

本发明采用目前先进的等温核酸基因扩增技术通过对45例急行心梗心衰基因组外显子测序结果的差异化表达筛选出来的自主开发的新的基因生物标志物，应用于急性心梗早期检测试剂盒，从而为心梗和心衰患者提供早期高灵敏度的基因分子诊断，特点为低成本,快速,可在15分钟内做出检测结果。

本发明的主要目的是提供PDE4DIP基因在急性心梗早期检测试剂盒中的应用，为心血管疾病的早期诊断提供快速特异的新的诊断方法，减少患病人群的死亡。

为实现上述目的，本发明一方面提出的急性心梗早期检测试剂盒，包括扩增及PDE4DIP基因。

优选地，所述的PDE4DIP基因核酸序列为：

优选地，所述的PDE4DIP基因核酸序列为：

优选地，急性心梗早期检测试剂盒，还包括DNA聚合酶和试剂。其中试剂包括DNA聚合酶，合成的引物，dNTP,缓冲液和纯净水。

优选地，PDE4DIP核酸扩增检测方法为：

体系1：

体系2：

将体系1在70℃水浴5min后，冰浴2min后，与体系2混合，于37℃15min， 42℃60min，70℃10min。

本发明另一方面提出PDE4DIP基因在急性心梗早期检测试剂盒中的应用，通过对PDE4DIP基因设计核酸基因探针和荧光标记物，来检测潜在的急性心梗和心衰的PDE4DIP基因标志物。