[发明专利]脐带间充质干细胞外泌体联合红景天多肽在美容养颜中的应用

权利要求书

1.脐带间充质干细胞外泌体联合红景天多肽在美容养颜中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述脐带间充质干细胞外泌体和红景天多肽的质量比为(400～800)∶(3～5)。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述红景天多肽通过如下方法制得：

(a)将红景天进行粉碎，再将粉碎的红景天和水混合后进行蒸煮，得到混合液；

(b)向冷却后的混合液中加入复合酶进行酶解，灭酶，离心，收集上清液；

(c)将上清液进行超滤，得到分子量为1000～2000Da的肽段，冷冻干燥，得到红景天多肽粗品；

(d)将红景天多肽粗品配置成溶液并采用0.45μm的微孔滤膜进行过滤，得到滤液；再将滤液采用Sephadex G-75凝胶柱进行洗脱，洗脱液为蒸馏水，按照出峰顺序收集第三个洗脱峰处的洗脱液，冷冻干燥，即得所述红景天多肽。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述蒸煮温度为105～115℃，时间为10～20min；所述洗脱速度为0.8ml/min。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述酶解温度35～38℃，时间为6～12h，pH值为4～6。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述复合酶由果胶酶、纤维素酶和胰蛋白酶按照2∶(2～3)∶(2～4)组成；所述复合酶添加量为红景天质量的0.8％～2％。

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述脐带间充质干细胞外泌体通过如下方法制得：

将原代脐带间充质干细胞进行传代培养，收集脐带间充质干细胞的第三代培养上清液；再将上清液以(3000～4000)×g进行离心去除细胞和细胞碎片；

向上清液中添加外泌体沉淀试剂进行充分混匀、静置，再以(10000～50000)×g离心20～40min，收集沉淀；

采用PBS重悬沉淀后置于纯化柱中，并将纯化柱置于收集管中，将收集管在4℃下以(3000～4000)×g进行离心8～12min，将收集管内溶液进行冷冻干燥，得到所述脐带间充质干细胞外泌体。

8.一种用于美容养颜的外泌体美容液，其特征在于，包括权利要求1中的脐带间充质干细胞外泌体和红景天多肽。

9.根据权利要求6所述的外泌体美容液，其特征在于，所述脐带间充质干细胞外泌体和红景天多肽的质量比为(400～800)∶(3～5)。

10.根据权利要求6所述的外泌体美容液，其特征在于，所述外泌体美容液中脐带间充质干细胞外泌体的含量为40～80mg/ml，红景天多肽含量为0.3～0.5mg/ml。