[发明专利]用于检测水稻细菌性谷枯病菌的组合产品及试剂盒

权利要求书

1.组合产品，包含：

上游引物：TCGCTCTCCCGAGGGAGATGACAGCCGCTACA；

下游引物：ACACGGAACACCTGGGTAGTCTCTGTAGGGAAG；以及

探针：CCATCTCAAATAAGCGCTTCCGCTATCCACTXTACTACTTCTTCCAGAT；

其中所述探针为基于重组酶聚合酶扩增技术的探针，第31位碱基T标记发光基团，第32位X为脱碱基核苷酸类似物，第33位碱基T标记淬灭基团，3’端进行阻断剂修饰；所述阻断剂用于阻断探针的聚合酶延伸。

2.根据权利要求1所述的组合产品，所述脱碱基核苷酸类似物为四氢呋喃。

3.根据权利要求1所述的组合产品，所述阻断剂为间臂，优选C3间臂。

4.根据权利要求1所述的组合产品，所述发光基团为FAM，所述淬灭基团是BHQ。

5.试剂盒，其包含权利要求1～4任一项所述的组合产品。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其还包含核酸提取试剂、等温核酸扩增所用试剂、阳性对照和阴性对照中的一种或多种。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，所述等温核酸扩增所用试剂包括能结合单链核酸的重组酶、单链DNA结合蛋白、链置换DNA聚合酶、辅助蛋白、核酸外切酶III、反转录酶、ATP、ATP再生体系所用试剂、pH调节剂、dNTP、各种分子量分布的BSA和/或PEG、DTT以及水中的一种或多种；

其中所述辅助蛋白用于改变重组酶-引物复合体解离及重新结合的可逆反应过程，使反应向更有利于等温核酸扩增进行。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，所述重组酶选自uvsX和/或RecA；

可选地，所述单链DNA结合蛋白为gp32；

可选地，所述链置换DNA聚合酶选自BSu DNA聚合酶和/或Sau DNA聚合酶；

可选地，所述辅助蛋白选自uvsY；

可选地，所述ATP再生体系所用试剂选自镁离子、磷酸肌酸及其平衡离子、肌酸激酶、肌激酶、焦磷酸酶、蔗糖以及蔗糖磷酸化酶中的一种或多种。

9.根据权利要求6～8任一项所述的试剂盒，所述等温核酸扩增所用试剂为冻干粉试剂或混合的液体试剂。

10.权利要求1～4任一项所述的组合产品，或权利要求5～9任一项所述的试剂盒在检测中的应用。

11.根据权利要求1所述的应用，检测在恒温扩增的条件下进行，温度为37℃～42℃，反应时间≥20min。