[发明专利]一株高产肌苷缓解溃疡性结肠炎的假长双歧杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一株高产肌苷缓解溃疡性结肠炎的假长双歧杆菌及其应用，属于功能性微生物技术领域。本发明提供了的假长双歧杆菌CCFM1253保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62274，保藏日期为2022年3月6日。本发明的假长双歧杆菌CCFM1253的肌苷产量可高达3.4mg/mL；本发明的假长双歧杆菌CCFM1253可以显著缓解结肠炎引起的体重损失，显著降低结肠中IL‑1β，IL‑6和TNF‑α水平和升高IL‑10水平，抑制髓过氧化物酶活性，提高其抗氧化酶活力，促进与结肠紧密连接相关蛋白(ZO‑1，Claudin‑1和Occludin)的表达，可见，本发明的菌株在制备预防和/或治疗结肠炎的产品中具有巨大的应用前景。

技术领域

本发明涉及一株高产肌苷缓解溃疡性结肠炎的假长双歧杆菌及其应用，属于功能性微生物技术领域。

背景技术

溃疡性结肠炎(UC)是一种慢性炎症反应，其发病率逐年的增加。调查发现，溃疡性结肠炎是影响儿童和青少年的最常见的胃肠道慢性疾病之一，17岁之前诊断的病例超过20％。近几年来，越来越多的研究者对溃疡性结肠炎的发病机理及治疗方法进行了深入的探索。溃疡性结肠炎的临床症状典型症状包括大便出血、腹泻、急迫、尿失禁、疲劳、排便频率增加、粘液排出、夜间排便和腹部不适。

目前的溃疡性结肠炎治疗主要通过抗炎和免疫抑制机制控制炎症。治疗溃疡性结肠炎常用的药物包括艾迪莎、美沙拉嗪、柳氮磺胺吡啶、氢化可的松、氢化波尼松和硫唑嘌呤等，它们通过调节相关炎症通途和提高抗氧化酶的活力等来改善溃疡性结肠炎。然而，长期服用这些药物可能产生多种严重的副作用，如高血压、糖尿病、关节炎和肾损伤等，更有甚者严重和潜在威胁生命的感染和肿瘤的风险。为了降低其并发症及其长期服用药物带来一些的副作用，迫切寻求一种更加有效且副作用小的干预方式。近几年来，许多研究者发现一些特异的益生菌对溃疡性结肠炎具有缓解作用。相对药物来说，益生菌对溃疡性结肠炎的干预具有较小的副作用。因此，筛选出具有抑制促炎因子、修护肠道屏障和提高抗氧化酶活力的益生菌对溃疡性结肠炎进行辅助治疗。

发明内容

本发明的第一个目的是提供了一株假长双歧杆菌(Bifidobacteriumpseudolongum)CCFM1253，所述假长双歧杆菌CCFM1253保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62274，保藏日期为2022年3月6日。

所述假长双歧杆菌(Bifidobacterium pseudolongum)CCFM1253来源于正常人粪便样本，该菌株经测序分析，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示，提取筛选得到的菌株的基因组进行16S rDNA扩增，获得PCR产物进行测序(上海华大基因科技有限公司)。将获得的序列在NCBI-Blast中进行核酸序列比对，结果显示，该菌株为假长双歧杆菌，命名为假长双歧杆菌(Bifidobacterium pseudolongum)CCFM1253。

所述假长双歧杆菌(Bifidobacterium pseudolongum)CCFM1253在MRS固体培养基上的菌落突起，呈光滑、圆形、乳白色、半透明状，直径为1～2mm。

本发明的第二个目的是提供一种微生物菌剂，所述微生物菌剂中，含有上述假长双歧杆菌CCFM1253，或含有假长双歧杆菌CCFM1253的发酵液，或含有假长双歧杆菌CCFM1253的冻干粉，或含有假长双歧杆菌CCFM1253灭活的菌体、或含有假长双歧杆菌CCFM1253的裂解物，或含有所述假长双歧杆菌CCFM1253提取物。

在本发明的一种实施方式中，所述微生物菌剂的制备方法为：

假长双歧杆菌CCFM1253接种到MRS培养基中，然后在36～38℃厌氧条件下培养20～30小时。培养液离心(8000～12000rpm/min，5～20min，0～8℃)，用生理盐水清洗3～5次，添加冻干保护剂，菌液最后的浓度高于1×10⁶CFU/mL，将其重悬液进行真空冷冻干燥，获得菌粉。