[发明专利]一株高效表达腺苷脱氨酶缓解结肠炎副干酪乳杆菌

说明书

本发明公开了一株高效表达腺苷脱氨酶缓解结肠炎副干酪乳杆菌，属于微生物技术领域。本发明提供了一株副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1223，于2022年3月6日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62271。本发明提供的副干酪乳杆菌CCFM1223改善结肠炎小鼠粪便松软、便血和体重；抑制结肠组织中促炎因子水平的升高；增加结肠组织中抗氧化酶活性；抑制结肠组织中丙二醛的含量；抑制结肠组织中髓过氧化物酶活力；上调结肠组织中紧密连接蛋白基因的转录水平，可见，本发明的副干酪乳杆菌CCFM1223制备预防和/或治疗结肠炎的产品中具有巨大的应用前景。

技术领域

本发明涉及一株高效表达腺苷脱氨酶缓解结肠炎副干酪乳杆菌，属于微生物技术领域。

背景技术

炎症性肠病的特征是胃肠道的非感染性慢性炎症，主要包括克罗恩病(可影响胃肠道从口腔到肛门的任何部分)、溃疡性结肠炎(仅限于结肠粘膜)和不确定的结肠炎，其中溃烂性结肠炎较为普遍。20世纪50年代以来，溃烂性结肠炎的发病率不断升高且发病年龄不断降低严重影响着患者及家人的生活质量。调查发现，溃烂性结肠炎的最高发病率大约为万分之三，而患病率高达千分之五，给社会医疗成本造成极大的负担。近几年来，我国溃烂性结肠炎患者增长速率增加，呈现出男多女少的趋势。目前溃烂性结肠炎尚无完全治愈的治疗方案，因此需深入研究溃烂性结肠炎病理过程与发病机制有望为开发新的干预方法提供帮助。

目前的溃疡性结肠炎治疗主要通过抗炎和免疫调节剂，以使疾病进入缓解期。治疗溃疡性结肠炎常用的药物包括5-氨基水杨酸、美沙拉嗪、柳氮磺胺吡啶、氢化可的松、氢化波尼松和硫唑嘌呤等。这些药物通过调节相关炎症通途和提高抗氧化酶的活力等方式有效的缓解溃烂性结肠炎。然而，长期服用会产生多种严重的副作用，如腹泻、头痛、发热和易疲劳等，更有甚者严重和潜在威胁生命的感染和肿瘤的风险。因此，有必要发展防治溃烂性结肠炎的新方法。近几年来，许多研究者发现一些特异的益生菌对溃疡性结肠炎具有缓解作用。相对药物来说，益生菌对溃疡性结肠炎的干预具有较小的副作用。因此，筛选出具有抑制促炎因子、修护肠道屏障和提高抗氧化酶活力的益生菌对溃疡性结肠炎进行辅助治疗。

发明内容

本发明的第一个目的是提供了一株副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillusparacasei)

CCFM1223，于2022年3月6日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCCNo：62271。

所述副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1223来源于新生健康婴儿粪便，提取菌株的全基因组DNA用于16S rDNA的扩增，收集扩增后的DNA片段用和测序(由苏州安升达科技有限公司，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示，经测序分析，结果显示，该菌株为副干酪乳杆菌，命名为副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)CCFM1223。

本发明的第二个目的是提供一种上述副干酪乳杆菌CCFM1223在制备含有腺苷脱氨酶的产品中的应用。

在本发明的一种实施方式中，所述含有腺苷脱氨酶产品的制备方法为：

(1)将副干酪乳杆菌CCFM1223种子液接入MRS液体培养基中，置于37培养箱下培养18h，制备得到发酵液；

(2)将制备得到的发酵液在6000rpm，4℃条件下离心3min，获得副干酪乳杆菌CCFM1223菌体细胞，将制备得到的菌体细胞添加至含有10mg/mL腺苷的5mL PBS溶液中，在37℃条件下发酵12小时，获得含有腺苷脱氨酶的液体。

本发明的第三个目的是提供了一种微生物菌剂，所述微生物菌剂中含有副干酪乳杆菌CCFM1223活细胞，或含有副干酪乳杆菌CCFM1223发酵液，或含有副干酪乳杆菌CCFM1223冻干粉，或含有副干酪乳杆菌CCFM1223灭活的菌体细胞。