[发明专利]一种基于胸腺嘧啶介导的电化学生物传感器同时检测Hg2+

权利要求书

1.构建了一种胸腺嘧啶介导的电化学传感器，实现了对Hg²⁺和CH₃Hg⁺的超灵敏形态分析，其特征包括以下几个方面：

(1)利用富含T碱基的DNA序列分别设计了Hg²⁺和CH₃Hg⁺的特异性适配体(Hp-Fc+S₁和S₂+S_A-MB)，Hp-Fc上标记的二茂铁(Fc)和S_A-MB上标记的亚甲基蓝(MB)两种信号分子分别指示Hg²⁺和CH₃Hg⁺的含量。

(2)当Hg²⁺存在时，Hp-Fc与S₁形成双链，导致Fc电流降低，当CH₃Hg⁺存在时，原先配对的S₂和S_A-MB不能结合，导致Fc电流降低。

(3)与Hg²⁺和CH₃Hg⁺反应完毕的DNA链被修饰到电极上，后采用差分脉冲伏安法(DPV)技术检测Fc和MB的还原峰电流，Fc和MB的还原峰电位和电流定性定量地反映了Hg²⁺和CH₃Hg⁺的浓度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于4条DNA序列的组成。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于Hg²⁺和CH₃Hg⁺具有各自的适配体。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于识别Hg²⁺的一条DNA链上标记Fc，识别CH₃Hg⁺的一条DNA链上标记MB。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于要使两组DNA链分别反应，反应温度为35℃，反应时间为1h。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于将DNA修饰到电极上后需在4℃下孵育10h。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于电化学测量使用三电极系统，工作电极为2mm GE，参比电极为Ag/AgCl(饱和KCl)电极，对电极为铂丝。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于用于DPV检测Hg²⁺和CH₃Hg⁺的起始电位为0.6V、终止电位为-0.5V、电位增量为0.001V、脉冲周期为0.05s、灵敏度1.e-005A/V。

9.根据权利要求1所述的方法，电解质为Tris-HCl溶液，其浓度为60mM，pH＝7.4。