[发明专利]叶酸修饰的Mn-Gold纳米团簇自组装体的制备及其产品和应用

说明书

本发明涉及一种叶酸修饰的Mn‑Gold纳米团簇自组装体的制备及其产品和应用，所述方法包括：MHA为配体的金纳米团簇的合成和纯化，氯化锰(MnCl₂)四水合物溶于水中配置MnCl₂母液，采用锰离子(Mn²⁺)诱导MHA为配体的金纳米团簇自组装成纳米颗粒，并在表面共价偶联叶酸分子，制备得到叶酸修饰的Mn‑Gold纳米团簇自组装体。本发明方法获得的产品用于胃癌消化道肿瘤的MRI成像和CT成像检测。

技术领域

本发明属于分子影像诊断领域。涉及一种叶酸修饰的Mn-Gold纳米团簇自组装体的制备及其产品和应用。本发明产品尤其是针对叶酸受体的靶向成像纳米探针方面的应用。

背景技术

磁共振成像（MRI）是利用图像重建技术将磁场中原子核共振产生的电磁信号转化为物体体内信息的一种成像技术。它可以在任何方向上显示物体的密度、空间分布、断层图像和三维图像等。核磁成像用于肿瘤的分子影像学诊断离不开成像造影剂的辅助。一般常用的MRI弛豫增强试剂都是含钆类的化合物，因为钆具有很强的顺磁弛豫增强能力。目前临床上常用的T1加权成像造影剂多采用三价钆离子，但是钆类对比剂有可能引起肾源性系统性纤维化，因此钆类对比剂的使用也具有一定的局限性。为降低钆离子的生物毒性，多采用二乙基三胺五乙酸之类的螯合剂进行配位螯合，降低其毒性。该方法不仅合成方法繁琐而且成本高。

此外，锰也是一种顺磁性金属，其毒性非常低，是生物体内一种必须的元素，二价的锰离子有5个未成对电子，也具有较强的弛豫增强效果，锰离子已经作为MRI对比剂广泛的用于MRI动物实验中。另外，锰对比剂的存在形式比较多样化，比如锰盐、小分子有机螯合物、大分子螯合物、氧化物纳米粒子等，并且锰对比剂毒性相对较低，因此在使用时可以较大剂量的使用。

胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，叶酸受体在70%胃癌组织中高表达，设计制备针对叶酸受体的靶向成像纳米探针，具有临床需求。MRI成像与CT成像是临床常见的两种成像模式。锰离子可用作T1加权造影剂。由于金原子较高的原子序数（Z=79）前期研究表明金纳米团簇能够用于CT成像。但是如何制备针对叶酸受体的靶向成像纳米探针，将锰离子(Mn²⁺)结合到纳米材料中，实现具有靶向效果的MRI与CT双模态成像未见报导。

发明内容

本发明目的在于提供一种简单，高效，低成本的叶酸修饰的Mn-Gold纳米团簇自组装体的制备方法，以降低产品的生物毒性。

本发明的再一目的在于提供上述方法获得的叶酸修饰的Mn-Gold纳米团簇自组装体产品。

本发明的又一目的在于提供所述产品的应用。

本发明目的通过下述方案实现：一种叶酸修饰的Mn-Gold纳米团簇自组装体的制备方法，采用锰离子(Mn²⁺)诱导金纳米团簇静电自组装，与叶酸分子共价偶联相结合构成叶酸修饰的Mn-Gold纳米团簇自组装体，包括如下步骤：

金纳米团簇的制备步骤：以6-巯基己酸（6-Mercaptohexanoic acid,MHA）作为巯基配体制备金纳米团簇，该金纳米团簇粒径均一、光学性质稳定、水溶性好，将MHA配体保护的金纳米团簇溶于去离子水中，形成溶液A；

锰离子(Mn²⁺)溶液制备步骤：将包括氯化锰的四水合物（MnCl₂·4H₂O）的锰离子(Mn²⁺)溶于去离子水中，配成溶液B，超声后备用；

锰离子(Mn²⁺)诱导的金纳米团簇的自组装步骤：将溶液B缓慢滴加入溶液A中，添加的锰离子(Mn²⁺) 离子和金纳米团簇的摩尔比1.2:1-2:1，诱导MHA配体保护的金纳米团簇自组装成金纳米团簇组装体；