[发明专利]一种胃癌早期筛查miRNA定量PCR检测试剂盒

说明书

本发明属于纳米检测技术领域，涉及一种胃癌早期筛查miRNA定量PCR检测试剂盒，包括检测胃癌高表达miRNA标志物的试剂，所述试剂中含有检测上述miRNA的引物或者探针。发明通过对胃癌患者血清与尿液样本中提取的外泌体进行基因测序，筛选出胃癌血清与尿液外泌体中共有的高表达miRNA。本发明还包括含有高表达miRNA的组合及应用。本发明还涉及利用荧光磁性纳米粒子定量检测miRNA的存在、数量或者表达量的方法，用于辅助早期胃癌的筛查和判断。

技术领域

本发明属于纳米检测技术领域，涉及胃癌高表达miRNA标志物。本发明还涉及通过设计检测引物，利用荧光磁性纳米粒子作为标记物，定量检测miRNA的相关PCR反应产物的方法和试剂盒，用于辅助胃癌患者的早期筛查和判断。

背景技术

胃癌之所以死亡率高，其早期症状不明显是重要原因。胃癌早期部分患者无症状，或者症状轻微。80%患者的初发症状是上腹不适，与消化不良相似，如发生腹痛，一般都较轻，且无规律性，进食后不能缓解。这些症状往往不被患者所重视，就医时也易被误认为胃炎或溃疡病。将近50%的胃癌患者都有明显食欲减退或食欲不振的症状，部分患者是因进食过多会引起腹胀或腹痛而自行限制进食的。原因不明的厌食和消瘦，很可能就是早期胃癌的初步症状，但是多数情况下都未能够引起患者重视。早期胃癌患者一般无明显的阳性体征，大多数患者除全身情况较弱外，仅在上腹部出现深压痛。

当胃癌发展扩大，尤其在浸润穿透浆膜而侵犯胰腺时，可出现持续性剧烈疼痛，并向腰背部放射，部分患者日益消瘦、乏力、贫血，最后表现为恶病质。癌肿长大后，可出现梗阻症状，贲门或胃底癌可引起下咽困难，胃窦癌引起幽门梗阻症状，腹部还可扪及肿块。癌肿表面形成溃疡时，则出现呕血和黑便。晚期胃癌还会出现转移灶如直肠前触及肿块、脐部肿块、锁骨上淋巴结肿大和腹水。当临床症状明显时，病变已属晚期，治疗手段受限、效果往往不尽如人意。如何早期发现胃癌，具有巨大的临床需求。

目前临床上主要通过胃镜活检结合病理分析来发现早期胃癌，然而这种诊断方法存在技术要求高、成本高昂、患者耐受性差等问题，无法作为常规筛查手段。临床上常规的血液肿瘤标志物检测筛查早期胃癌，概率仍比较低。到目前为止，统计数据表明我国早期胃癌的发现率仍低于15%，急需新的简便、快速筛查早期胃癌的新技术方法。

近年来，循环系统miRNA作为肿瘤诊断标志物的研究越来越广泛。作为循环系统各类特征分子的重要载体之一，外泌体对于胃癌的发生和治疗，也具有独特的生物学意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种辅助早期筛查胃癌的标志物。

本发明要解决的另一个技术问题是提供上述辅助早期筛查标志物的相关的检测方法。

本发明要解决的又一个技术问题是提供上述辅助早期筛查标志物的相关的检测试剂盒。

本发明提供一种辅助早期筛查胃癌的标志物，涉及胃癌患者血清与尿液的外泌体中筛选出的高表达miRNA标志物，通过设计PCR检测引物或者探针，利用荧光磁性纳米粒子作为标记物，定量检测miRNA的PCR反应产物，用于辅助早期胃癌患者的筛查。

本发明提供了一种试剂，所述试剂中含有检测胃癌高表达miRNA的引物或者探针；所述的miRNA选自下列中的一个或者多个：