[发明专利]一种核桃青皮抗肿瘤活性蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种核桃青皮抗肿瘤活性蛋白，其特征在于：所述抗肿瘤活性蛋白是以核桃青皮为原料提取到的分子量为66～90kDa的蛋白，SDS-PAGE凝胶电泳显示是单一条带；

所述抗肿瘤活性蛋白的制备方法包括以下步骤：

步骤1，取核桃青皮，阴干；

步骤2，取阴干后的核桃青皮，剪碎后，按每克加4～6mL的蛋白提取液，4℃下浸泡10～16h，离心后，取上清液；所述蛋白提取液为pH7.4的磷酸缓冲液；

步骤3，在步骤2的上清液中加入2～3倍体积-20℃提前预冷的丙酮，静置0.5～1.5h后，4℃离心收集沉淀，在-20℃下放置20～40min，得到沉淀为核桃青皮粗蛋白；

步骤4，将步骤3得到的沉淀用磷酸缓冲液溶解，离心后取上清液；

步骤5，将活性炭以8～12g/L加入到步骤4的上清液中，连续搅拌5min，静置20～40min吸附色素，过滤后得到纯化后的核桃青皮抗肿瘤活性蛋白。

2.根据权利要求1所述的核桃青皮抗肿瘤活性蛋白，其特征在于：所述步骤2中核桃青皮与蛋白提取液的质量体积比为1：4，单位为g/mL。

3.根据权利要求1所述的核桃青皮抗肿瘤活性蛋白，其特征在于：所述步骤2、3、4和5均在0～4℃条件下进行。

4.一种权利要求1所述的核桃青皮抗肿瘤活性蛋白的应用，其特征在于：用于制备抗肝癌、大肠癌、乳腺癌、宫颈癌以及卵巢腺癌的药物。

5.一种含有权利要求1所述的核桃青皮抗肿瘤活性蛋白的药物组合物。