[发明专利]促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法

权利要求书

1.促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法，其特征在于包括以下步骤：

1)丛枝菌根真菌的土样采集：随机选择生长健壮的太空香蕉植株，在其根际采集土样；首先去除1～3cm地表面的杂草、枯枝落叶等覆盖物，然后挖取0～15cm深的土壤装入塑料袋中；样品采回后倒出，去除碎石、枯枝等杂物后放在阴凉通风处自然晾干保存备用；

2)丛枝菌根真菌的分离：将步骤1)风干的土样，放入容器中加水浸泡，浸泡后过双层分样筛，上层筛孔径1mm，下层筛400目，反复洗刷土样，收集下层筛中的残留物于大号离心管中离心，去掉上清液后加入50％的蔗糖溶液，搅拌均匀后迅速放入离心机再离心，取出将上清液倒入400目筛中，收集残留物于培养皿中；

3)丛枝菌根真菌接种剂单孢扩繁：将步骤2)分离筛选的孢子，单个孢子分离出来在宿主白三叶草中进行单孢扩繁；

4)丛枝菌根真菌的筛选与鉴定：单孢扩繁培养1个月后，根据步骤2)方法分离白三叶草培养基质中的丛枝菌根真菌孢子，观察孢子的形状、颜色、孢壁颜色、孢壁结构、组成孢子内含物等，测量孢子大小、孢壁厚度；鉴定并筛选出为丛枝菌根真菌的白色球囊霉(Glomusalbidum)；

5)接种菌剂的制备：将含有步骤4)鉴定为白色球囊霉的培养基质，在大量播种白三叶草分盆培养，培养1～2个月后抽样镜检观察确认侵染成功后，将含有孢子、菌丝及侵染根段的根际土作为接种菌剂；

6)太空香蕉组培苗移栽接种菌剂：将步骤5)处理的接种菌剂与栽培基质按质量比1︰5～10进行混合，然后挑选长势一致的太空香蕉组培苗移栽到含有接种菌剂的栽培基质中培养。

2.如权利要求1所述促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法，其特征在于在步骤2)中，所述浸泡的时间为30～50min。

3.如权利要求1所述促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法，其特征在于在步骤2)中，所述离心是以3000r/min的速度离心3min；所述再离心是以1500r/min的速度离心2min。

4.如权利要求1所述促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法，其特征在于在步骤3)中，所述丛枝菌根真菌接种剂单孢扩繁，单孢扩繁的基质采用河沙与泥炭土为3︰1；生长环境：光照强度1500～2500Lux，光照时间12h/d。

5.如权利要求1所述促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法，其特征在于在步骤4)中，所述丛枝菌根真菌的白色球囊霉的形态为：孢子单生，颜色淡黄色，球形，平均直径为182.03μm；孢子壁2层，第1层无色透明，稍厚或与内层等厚，1.5μm；内层浅黄，稍薄，1.0μm；与Melzer’s试剂反应不明显，孢子内含物为白色至近透明的大小不等的圆珠状油滴。

6.如权利要求1所述促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法，其特征在于在步骤5)中，所述白三叶草的培养基质为河沙和泥炭土按体积比3︰1混合，生长环境：光照强度1500～2500Lux，光照时间12h/d。

7.如权利要求1所述促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法，其特征在于在步骤6)中，所述栽培基质为红壤和泥炭土按体积比2︰1混合。

8.如权利要求1所述促进太空香蕉组培苗生长的丛枝菌根真菌筛选与接种方法，其特征在于在步骤6)中，所述太空香蕉组培苗移栽到含有接种菌剂的栽培基质中培养，其生长环境：光照强度1500～2500Lux，光照时间12h/d。