[发明专利]一种特异性检测半胱氨酸的表面增强拉曼光谱探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种特异性检测Cys的表面增强拉曼光谱探针CEG，其特征在于，所述探针CEG包括金纳米星基底GNS，以及通过金炔键修饰在所述金纳米星基底GNS上的Cys识别配体CRP和参比分子对炔基苯甲腈EBN。

2.一种特异性检测Cys的表面增强拉曼光谱探针CEG的制备方法，其特征在于，先合成含端炔基的可以特异性识别半胱氨酸Cys的识别配体CRP；再通过种子生长法合成金纳米星GNS作为拉曼增强基底；然后将所述Cys识别配体CRP与对炔基苯甲腈EBN的混合溶液加入到所述的金纳米星水溶液中，通过金炔键修饰到所述金纳米星基底GNS上，混合反应后离心，得到特异性识别Cys的所述表面增强拉曼光谱探针CEG即GNS@CRP@EBN。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，

所述金纳米星基底GNS、Cys识别配体CRP和参比分子EBN的浓度比为(0.5-2mg/mL)：(0.2-0.5mM)：(0.1-0.25mM)；所述反应温度为40-60℃；所述反应时间为6-12h。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，进一步还包括对所述混合溶液进行20-60min除氧操作。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述Cys识别配体CRP的制备过程如反应式(A)所示：

所述制备方法包括如下步骤：

步骤(1)：将4-三甲基硅乙炔基苯甲醛和碳酸钾在无水甲醇中混合搅拌，过滤后通过柱层析法纯化得到产物4-乙炔基苯甲醛；

步骤(2)：将所述步骤(1)制备得到的4-乙炔基苯甲醛、2-羟基苯乙酮和八水合氢氧化钡在无水甲醇中混合搅拌，得到产物3-(4-乙炔基苯基)-1-(2-羟基苯基)-2-丙烯-1-酮；

步骤(3)：将所述步骤(2)制备得到的3-(4-乙炔基苯基)-1-(2-羟基苯基)-2-丙烯-1-酮、丙烯酰氯和三乙胺在无水二氯甲烷中混合搅拌，得到Cys配体CRP。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，

所述步骤(1)中：所述4-三甲基硅乙炔基苯甲醛和碳酸钾的摩尔比为1：(1-2)；所述无水甲醇的加入量与4-三甲基硅乙炔基苯甲醛的体积/摩尔比为(75-150mL)：(20-40mmol)；所述反应的温度为25-40℃；所述反应时间为2-6小时；所述柱层析纯化法洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂；所述混合溶剂中乙酸乙酯和石油醚体积比为1：(3-5)；和/或，

所述步骤(2)中：所述4-乙炔基苯甲醛、2-羟基苯乙酮和八水合氢氧化钡的摩尔比为1：(1-1.5)：(1-2)；所述无水甲醇加入量与4-三甲基硅乙炔基苯甲醛的体积比为(75-150mL)：(20-40mmol)；所述反应的温度为25-67℃；所述反应时间为8-16h；和/或，

所述步骤(3)中：所述3-(4-乙炔基苯基)-1-(2-羟基苯基)-2-丙烯-1-酮、丙烯酰氯和三乙胺的摩尔/体积比为1：(1-2)：(1.2-2)；所述无水二氯甲烷加入量与3-(4-乙炔基苯基)-1-(2-羟基苯基)-2-丙烯-1-酮的体积/摩尔比为(50-100mL)：(5-10mmol)；所述反应温度为25-40℃；所述反应时间为8-16h；所述柱层析纯化法洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂；所述混合溶剂中乙酸乙酯和石油醚体积比为1：(10-15)。

7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述金纳米星GNS的制备方法为：将柠檬酸钠水溶液加入到煮沸的氯金酸水溶液中剧烈搅拌得到金种溶液；将所述金种溶液、氯金酸水溶液、硝酸银水溶液和抗坏血酸水溶液混合，用1M的稀盐酸调pH，搅拌混匀，离心后得到所述金纳米星GNS。