[发明专利]一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器的制备方法

权利要求书

1.一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备第一级催化发夹自组装反应体系(CHA)；

S2、制备第二级杂交链式反应体系(HCR)；

S3、荧光标记杂交链式反应中HP3链；

S4、形成荧光传感器。

2.根据权利要求1所述的一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述S1当中的第一级催化发夹自组装反应由以下步骤制备而成：Trigger链、HP1链和HP2链混合，其中Trigger链、HP1和HP2链的浓度比为1-2:1:1。

3.根据权利要求1所述的一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述S2当中的第二级杂交链式反应由以下步骤制备而成：所述S1当中的反应产物、HP3链和HP4链混合，其中HP3链和HP4链的浓度比为1:1～2:1。

4.根据权利要求1所述的一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述S3中，HP3链的臂部标记荧光基团和猝灭基团。

5.根据权利要求 1—4任一所述的一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器的制备方法，其特征在于：所述S3当中形成荧光传感器为：幽门螺杆菌的核酸适配体链Aptamer、Trigger链、HP1链、HP2链、HP3链和HP4链在selection buffer中形成荧光传感器。

6.根据权利要求 1—5任一所述的一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器的制备方法，其特征在于：幽门螺杆菌的核酸适配体DNA sequences(5’-3’)；

Trigger链的基因序列为：

GTAGCTGGATCTCGTCGATACACG；

HP1链的基因序列为：

CGTGTATCGACGAGATCCAGCTACTACACCAACGACGCTGGATCTCGTCGAGCCGAAAC；

HP2链的基因序列为：

ATCCAGCGTCGTTGGTGTAGTAGCTGGATCTCGTCGACTACACCAACGACG；

HP3链的基因序列为：

GCCG/Cy3/AAACGAGTCACTGTTT/BHQ2/CGGCTCGACGAG；

HP4链的基因序列为：

AGTGACTCGTTTCGGCCTCGTCGAGCCGAAAC。

7.一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器，其特征在于：该荧光传感器由权利要求1-6任一所述的方法制备而成。

8.一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器检测幽门螺杆菌的方法，其特征在于：该方法将权利要求1-7任一所述的方法制备的荧光传感器用于检测幽门螺杆菌菌体。

9.根据权利要求8所述的一种基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器检测幽门螺杆菌的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

首先、根据权1-7任一所述的方法制备基于发夹DNA链的级联DNA组装反应的荧光传感器；

接着、将不同浓度的幽门螺杆菌各自在S4的荧光传感器中反应，分别测试荧光传感器的荧光强度，构建标准曲线，得到线性方程；

最后、将待测幽门螺杆菌菌体的样液在S4制备的荧光传感器中反应，采用荧光光谱仪测定其荧光发射光谱，根据标准曲线或者线性方程，计算幽门螺杆菌的含量，判断是否含有幽门螺杆菌。