[发明专利]一种利用重相乳酸生产单细胞蛋白的方法在审
申请号: | 202210526116.3 | 申请日: | 2022-05-16 |
公开(公告)号: | CN114958631A | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 单雨瑶;王竞辉;杨付伟;马光;张雅萍;王琛;张稳;孙烨 | 申请(专利权)人: | 万华化学(四川)有限公司;万华化学集团股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12N1/14;C12N1/38;C12P1/02;C12P21/00;C12P7/6409;C12R1/645 |
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地址: | 620031 四川省眉山市东坡*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 乳酸 生产 单细胞 蛋白 方法 | ||
1.一种利用重相乳酸生产单细胞蛋白的方法,其特征在于,所述方法以重相乳酸为原料,通过解脂耶氏酵母和裂殖壶菌两种菌种混菌发酵制备得到单细胞蛋白;
其中,所述重相乳酸为乳酸生产过程中形成的重组分副产物。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述解脂耶氏酵母在上罐发酵前培养种子液;
优选地,所述解脂耶氏酵母的培养基为葡萄糖、硫酸铵、磷酸二氢钾、七水合硫酸镁、胰蛋白胨中的一种或多种;
优选地,所述解脂耶氏酵母的培养基为葡萄糖3~20g/L,硫酸铵0.5~4g/L,磷酸二氢钾0.5~3g/L,七水合硫酸镁0.1~1g/L,胰蛋白胨5~20g/L;
和/或,解脂耶氏酵母种子液培养温度为25~40℃,培养时间为16~48h。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述裂殖壶菌在上罐发酵前培养种子液;
优选地,所述裂殖壶菌培养基为葡萄糖、酵母提取物、玉米浆、硝酸钾、七水合硫酸镁、二水合氯化钙中的一种或多种;
优选地,所述裂殖壶菌培养基为葡萄糖10~50g/L,酵母提取物1~20g/L,玉米浆0.1~3g/L,硝酸钾0.2~3g/L,七水合硫酸镁0.2~2g/L,二水合氯化钙0.05~0.2g/L;
和/或,所述裂殖壶菌种子液的培养温度为20~30℃,培养时间为24~72h。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述发酵过程的培养基含有钾、钠、镁、铜、钴、锰金属元素中的一种或多种;
优选地,金属元素的形式为磷酸盐、酸式磷酸盐、氯化物、硫酸盐、柠檬酸盐中的一种或多种;
优选地,金属元素盐的添加量分别为钾盐5~20g/L,钠盐10~20g/L,镁盐0.5~4g/L,铜盐0.1~2g/L,钴盐0.01~0.1mg/L,锰盐0.001~0.02mg/L。
5.如权利要求1-4中任一项所述的方法,其特征在于,所述方法在发酵培养基中加入重相乳酸;
优选地,加入的重相乳酸为培养基总质量的1~10wt%,优选3~7wt%。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法,其特征在于,所述解脂耶氏酵母在发酵培养基中的接种量为培养基体积的5%~20%,优选10%~17%;
和/或,接种解脂耶氏酵母后的培养温度为25~40℃,优选28~37℃;
和/或,所述裂殖壶菌在发酵培养基中的接种量为培养基体积的10%~20%,优选13%~18%;
和/或,接种裂殖壶菌后的培养温度为20~30℃,优选23~28℃。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于,所述发酵过程中pH值为6.0~8.0,优选6.5~7.4,发酵通气量为0.5~3.5vvm,优选1.0~2.5vvm,搅拌转速为20~500rpm,优选100~300rpm。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法,其特征在于,所述发酵过程中在发酵液的菌体OD值达到100~150时开启放料,优选OD值达到120~130时开启放料;
和/或,所述的发酵液从发酵罐中放出,经过滤后,清夜返回发酵罐继续发酵,浓缩液经干燥得到单细胞蛋白产品;
和/或,连续发酵运转周期为60~90天;
和/或,以干重计,单细胞蛋白产品的单位产量为2~4g/L/h。
9.一种单细胞蛋白,采用权利要求1-8中任一项所述的利用重相乳酸生产单细胞蛋白的方法制备得到。
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