[发明专利]一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测方法及其试剂盒

权利要求书

1.一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒，其特征在于，包括混标储备液；所述10种单标储备液的溶质分别为氯吡格雷、利伐沙班、阿哌沙班、达比加群、替格瑞洛、瑞舒伐他汀、去羟乙氧基替格瑞洛、阿托伐他汀、邻羟基阿托伐他汀和对羟基阿托伐他汀。

2.根据权利要求1所述的一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括空白基质；所述空白基质为过滤人血清。

3.根据权利要求1所述的一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括沉淀剂；所述沉淀剂为甲醇。

4.根据权利要求1所述的一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括流动相；所述流动相包括流动相A液和流动相B液；

所述流动相A液为含0.1％甲酸的1mM-5mM甲酸铵水溶液；所述流动相B液为含0.1％甲酸的1mM-5mM甲酸铵甲醇溶液。

5.根据权利要求1所述的一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括质控品；所述质控品包括高质控品、中质控品和低质控品。

6.一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，混合标准工作液的制备：通过用甲醇分别制备10种浓度不同的单标储备液，后分别取不同体积的单标储备液制备成不同浓度的混标储备液；将混标储备液用空白基质逐级稀释，分别得到W1-W9的混合标准工作液；

S2，质控品的制备：将混合标准工作液W1通过用空白基质稀释，分别得到低中高三种质控品；

S3，待测样本的处理：精密移取生物样本和空白基质置于离心管中，加入甲醇溶液，涡旋震荡，并离心，后置于-20℃冷冻；

S4，将待测样本进行检测。

7.根据权利要求6所述的一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，还包括将混合标准工作液和质控品进行检测，并绘制标准曲线的步骤：以混合标准工作液的目标物峰面积作为标准曲线图的纵坐标y，以混合标准工作液中浓度作为标准曲线图的横坐标x，得到标准曲线方程。

8.根据权利要求6所述的种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，所述待测样本的检测条件如下：

色谱条件如下：

流动相A液为含0.1％甲酸的1mM-5mM甲酸铵水溶液，所述流动相B液为含0.1％甲酸的1mM-5mM甲酸铵甲醇溶液；

流速为0.2-0.4mL/min，柱温为20-40℃，进样1-10μL；

采用梯度洗脱方式；其中洗脱梯度如下：在0-0.3min，流动相B液的体积为2％；在0.3-2.0min，流动相B液的体积升高到98％；在2.0-3.5min，流动相B液的体积维持98％；在3.6min，流动相B液的体积降到2％，并维持在2％到4.0min；

串联-质谱条件如下：

离子源：电喷雾离子源，正离子模式；喷雾毛细管电压：1.0-3.5KV；脱溶剂气温度：400-500℃；脱溶剂气流速：800-1000L/Hr；离子源温度：130-150℃；脱溶剂气压力：8bar；碰撞气压力：0.7bar；扫描模式：多反应监测。

9.根据权利要求8所述的一种基于LC-MS的10种心血管药物血清的检测试剂盒的检测方法，其特征在于，多反应监测的定量分析离子对如下：氯吡格雷定量分析离子对m/z322.0→211.9，利伐沙班定量分析离子对m/z 435.0→144.8，阿哌沙班定量分析离子对m/z460.1→443.2，达比加群定量分析离子对m/z 472.2→289.1，替格瑞洛定量分析离子对m/z523.1→152.9，瑞舒伐他汀定量分析离子对m/z 481.5→258.1，去羟乙氧基替格瑞洛定量分析离子对m/z 479.1→152.9，阿托伐他汀定量分析离子对m/z 559.5→440.1，邻羟基阿托伐他汀定量分析离子对m/z 574.9→440.1，对羟基阿托伐他汀定量分析离子对m/z574.7→440.2。