[发明专利]一种富含外泌体的微颗粒脂肪片段提纯方法及其乳化器在审
| 申请号: | 202210519217.8 | 申请日: | 2022-05-13 |
| 公开(公告)号: | CN114908044A | 公开(公告)日: | 2022-08-16 |
| 发明(设计)人: | 安阳 | 申请(专利权)人: | 北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院) |
| 主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12M1/33;C12M1/12;C12M1/00;A61L27/36 |
| 代理公司: | 北京崇智知识产权代理有限公司 11605 | 代理人: | 吕玉博 |
| 地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 富含 外泌体 颗粒 脂肪 片段 提纯 方法 及其 乳化 | ||
1.一种富含外泌体的微颗粒脂肪片段提纯方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤S2,在乳化器上端胶管接入含泊洛沙姆188的生理盐水袋,乳化器下端胶管接入置于地面的废液袋,乳化器上下两端胶管上的阀门处于关闭状态;
步骤S3,倒置所述乳化器并打开所述阀门,振动乳化器直至含泊洛沙姆188的生理盐水填充整个乳化器的乳化空间并排光空气后,关闭两端阀门;
步骤S4,翻转所述乳化器,将注射器内剪碎的脂肪组织由上端盖的入口肝素帽注入乳化空间,脂肪组织被上端盖处的上切割网切碎;
步骤S5,反复震荡乳化器使其内的乳化球充分撞击上切割网和下切割网以充分撞击脂肪组织形成的脂肪簇,乳化脂肪簇,减小颗粒直径的同时,将脂肪组织中的油脂释放出来;
步骤S6,静置乳化器,待脂肪簇全部悬浮于乳化空间上方后,打开两端阀门,含泊洛沙姆P188的生理盐水继续冲洗乳化器带走残留的油脂与血液,直至乳化器内液体变得较为清澈,关闭两端阀门;
步骤S7,重复步骤S4-S6,直至乳化器内液体变得澄清;
步骤S8,倒置乳化器,下端盖的出口肝素帽和上端盖的入口肝素帽分别连接注射器,待脂肪簇全部悬浮于上端后,下端盖的注射器注入含泊洛沙姆P188的生理盐水,下端盖注射器内获得脂肪簇与含泊洛沙姆P188的生理盐水的混合物。
2.根据权利要求1所述的富含外泌体的微颗粒脂肪片段提纯方法,其特征在于,在步骤S2之前,还包括步骤S1,在超净台内用紫外线对乳化器进行杀菌消毒30min。
3.根据权利要求1或2所述的富含外泌体的微颗粒脂肪片段提纯方法,其特征在于,在步骤S2中,含泊洛沙姆P188的生理盐水袋为泊洛沙姆P188含量为5%-20%。
4.根据权利要求1或2所述的富含外泌体的微颗粒脂肪片段提纯方法,其特征在于,在步骤S5中,采用振荡器反复震荡乳化器10min-30min,震荡力为2000g。
5.一种如权利要求1至4中任一项所述微颗粒脂肪片段提纯方法中使用的微颗粒脂肪片段提取乳化器,其特征在于,包括乳化筒以及分别安装在所述乳化筒的两端的上端盖和下端盖,所述乳化筒内形成有用于乳化脂肪组织的乳化空间,在所述乳化空间内设置有多个乳化球;在乳化器内对应所述上端盖处和所述下端盖处分别设置有上切割网和下切割网,在所述乳化筒内还设有将所述乳化空间分隔为上乳化空间和下乳化空间的第三切割网,多个所述乳化球分别放置在所述上乳化空间和所述下乳化空间内。
6.根据权利要求5所述的微颗粒脂肪片段提取乳化器,其特征在于:所述乳化筒的内壁上形成有插槽,所述第三切割网的边缘插接在所述插槽内。
7.根据权利要求6所述的微颗粒脂肪片段提取乳化器,其特征在于:所述第三切割网包括筛网以及设置在所述筛网边缘处的固定框,所述固定框为弹性件,所述固定框插接在所述插槽内。
8.根据权利要求5所述的微颗粒脂肪片段提取乳化器,其特征在于:所述乳化筒包括上乳化筒和下乳化筒,所述上乳化筒内形成有所述上乳化空间,所述下乳化筒内形成有所述下乳化空间,所述上乳化筒和所述下乳化筒通过连接件安装在一起,所述第三切割网安装在所述连接件上。
9.根据权利要求5至8中任一项所述的微颗粒脂肪片段提取乳化器,其特征在于:所述第三切割网上形成有通孔,所述通孔的直径大于或等于所述乳化球的直径。
10.根据权利要求5至8中任一项所述的微颗粒脂肪片段提取乳化器,其特征在于:所述乳化筒的内壁位于乳化筒的两个端口处分别形成有固定槽,所述上切割网和所述下切割网的边缘分别插接在所述固定槽内;
所述上切割网固定在所述上端盖上,所述下切割网固定在所述下端盖上,在所述上端盖和所述下端盖安装在所述乳化筒上时,所述上切割网和所述下切割网至少部分伸入所述乳化筒内;
所述上端盖设有入口肝素帽,所述下端盖上设有出口肝素帽,所述入口肝素帽为三通结构,一通连接至从患者受体获取的脂肪组织容器,一通连接至生理盐水容器,一通连接至所述清洗振荡分离圆筒容器,所述入口肝素帽为单向阀;所述出口肝素帽为三通结构,一通连接至从待移植脂肪组织的收集容器,一通连接至废液收集容器,一通连接至所述清洗振荡分离圆筒容器,所述出口肝素帽为单向阀。
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