[发明专利]一种枸橼酸铁及其六种有机酸的高效液相色谱分离分析方法

说明书

本发明公开一种枸橼酸铁及其六种有机酸的高效液相色谱分离分析方法，即采用高效液相色谱仪，以AQ‑C18 5μm×4.6mm×250mm柱和Hydro‑RP 80A 4μm×4.6mm×250mm柱为色谱柱，以磷酸水溶液和磷酸盐缓冲溶液为流动相，控制流动相的流速为0.80‑1.20mL/min；色谱柱温度为30℃；进样量为20μL；检测波长为210nm的条件下进行色谱分离，有效的实现了枸橼酸铁及其六种有机酸杂质的分离和测定。本发明峰形好，无拖尾，该方法具有可行性高，操作简便，分离效果好，分离成本低等特点。

技术领域

本发明属于药物分析领域，涉及药用级枸橼酸铁，具体来说是一种枸橼酸铁 及其六种有机酸的高效液相色谱分离分析方法。

背景技术

枸橼酸铁的英文名是Ferric Citrate Hydrate，化学名为枸橼酸铁水合物，分子式为FeC₆H₅O₇+nH₂O。枸橼酸铁是治疗慢性肾脏病(Chronic kidney disease， CKD)，该药用于CKD患者的益处除了可以改善体内贫血状态外，还能够通过调 节钙磷代谢和血红蛋白水平进而延缓肾功能减退，改善预后。含铁磷结合剂能降 低慢性肾脏病患者的血磷水平，同时可以在一定程度上改善肾脏功能和心功能。 因此，对枸橼酸铁中有机酸杂质分离方法研究有着重要的药用价值和工业价值。 枸橼酸铁的结构式如下所示：

根据相关文献报道，合成枸橼酸铁主要是用三氯化铁作为起始物料，与氢氧 化钠反应，生成氢氧化铁絮状物，过滤的絮状物再与一水合柠檬酸反应，反应完 全后，加入有机溶剂，将枸橼酸铁水合物析出。具体工艺路线如下：

FeCl₃·6H₂O+3NaOH→Fe(OH)₃+3NaCl+6H₂O

Fe(OH)₃+C₆H₈O₇·H₂O→枸橼酸铁水合物

枸橼酸铁在合成过程中柠檬酸会分解出多种有机酸杂质，本发明所涉及到的 有机酸及其具体结构式分解过程如下：

分解的有机酸分别有乙酸、1.3-丙酮二羧酸、顺式乌头酸、反式乌头酸、乙 酰乙酸、衣康酸。

由于枸橼酸铁在合成过程中柠檬酸受热会不稳定而分解，生成多种有机酸杂 质进而影响药物活性。因此控制枸橼酸铁中有机酸的含量对于药品改善肾功能衰 退，在一定功能上改善贫血，保护广大患者用药的安全性具有重要的意义。通过 大量文献检索，目前还没有对枸橼酸铁中有机酸杂质分离分析的相关文献报道， 因此开发一种枸橼酸铁中有机酸分离的高效液相分离分析方法，这对医药生产企 业来说显得尤为重要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供一种枸橼酸铁及其六种有机酸的高效液 相色谱分离分析方法，以及提供一种枸橼酸铁及其六种有机酸的高效液相色谱分 离分析方法。

为了解决上述问题，本发明提供了一种枸橼酸铁及其六种有机酸的高效液相 色谱分离分析方法，采用如下的色谱分离条件进行分离：

流动相流速为0.80-1.20mL/min；色谱柱温度为30℃；进样量为20μL；检测 波长为210-240nm；流动相为磷酸水溶液和磷酸盐缓冲溶液；色谱柱为 AQ-C18 5μm×4.6mm×250mm柱、Hydro-RP 80A 4μm×4.6mm×250mm柱、 CAPCELL PAK ADME 3μm×4.6mm×250mm柱、Ultimate OAA 5μm 4.6mm×300mm柱、Acclaim Mixed-Mode WAX-1 5μm×4.6mm×250mm柱。