[发明专利]一种有核红细胞模拟物及制备方法

说明书

本发明涉及血细胞分析荧光检测技术领域，具体涉及一种有核红细胞模拟物及制备方法；获取动物血液并过滤，得到过滤血液；将所述过滤血液离心，得到离心液，并去掉所述离心液中的上清和白细胞，得到纯红细胞；使用固定剂重悬固化所述纯红细胞，得到全固化细胞；使用PBS缓冲液离心洗涤所述全固化细胞去除固定剂，得到半成品细胞，并将所述半成品细胞保存在细胞保存液中，得到有核红细胞模拟物；通过荧光‑散射原理的血细胞分析仪对所述有核红细胞模拟物进行分析，得到分析结果，该方法用固化剂处理红细胞，提高了红细胞与荧光染色试剂的结合能力，模拟有核红细胞，红细胞为哺乳类、爬行类的红细胞，原料来源易得，生产成本低廉。

技术领域

本发明涉及血细胞分析荧光检测技术领域，尤其涉及一种有核红细胞模拟物及制备方法。

背景技术

正常人成熟红细胞不含细胞核，红细胞发育过程中的幼稚状态称为有核红细胞，正常情况下存在于骨髓中，但在某些病理条件下，外周血中也会存在有核红细胞。随人体外周血内的有核红细胞进行检测，可以为某些疾病的诊断提供证据，具有非常大的临床意义。越来越多的血细胞分析仪具备有核红细胞的检测功能，血细胞分析仪检测结果的准确性需要质控物进行质量控制。

现有技术CN102109430B采用荧光染色抑制剂降低白细胞与荧光染料的结合能力的方法模拟有核红细胞，但容易干扰检测用荧光信号，现有技术CN109459372A通过在红细胞上加载DNA或RNA片段用来模拟人有核红细胞的荧光特性。

但上述技术分析血细胞都存在工艺复杂，成本较高的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种有核红细胞模拟物及制备方法，旨在解决现有血细胞分析技术成本较高的问题。

为实现上述目的，本发明提供了一种有核红细胞模拟物制备方法，包括以下步骤：

获取动物血液并过滤，得到过滤血液；

将所述过滤血液离心，得到离心液，并去所述离心液中的掉上清和白细胞，得到纯红细胞；

使用固定剂重悬固化所述纯红细胞，得到全固化细胞；

使用PBS缓冲液离心洗涤所述全固化细胞，直至去除所述全固化细胞中的固定剂，得到半成品细胞，并将所述半成品细胞保存在细胞保存液中，得到有核红细胞模拟物；

通过血细胞分析仪对所述有核红细胞模拟物进行分析，得到分析结果。

其中，所述固定剂为醛类固剂，选自甲醛、乙醛和戊二醛。所述醛类固定剂的浓度优选为0.01％～5％(W/V)，所述醛类固定剂包括固定剂一、固定剂二和固定剂三，所述固定剂一包括0.5％甲醛、0.2g/L NaCl、0.34g/L Na₂HPO₄和0.24g/LKH₂PO₄，pH为7.2±0.2，渗透压为300±20mOsm/kgH₂O，所述固定剂二包括3％乙醛、0.2g/LNaCl、0.34g/LNa₂HPO₄和0.24g/LKH₂PO₄，pH为7.2±0.2，渗透压为300±20mOsm/kgH₂O，所述固定剂三包括0.1％戊二醛、0.2g/LNaCl、0.34g/L Na₂HPO₄和0.24g/L KH₂PO₄，pH为7.2±0.2，渗透压为300±20mOsm/kgH₂O。。

其中，所述PBS缓冲液包括8g/L NaCl、0.2g/L KCl、1.44g/L Na₂HPO₄和0.24g/LKH₂PO₄，pH为7.2±0.2，渗透压为300±20mOsm/kgH₂O。