[发明专利]一种用于防治蔬菜菌核病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用

说明书

本申请本发明公开了一种用于防治蔬菜菌核病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用，所述贝莱斯芽孢杆菌菌株的分类命名为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，株号Bv20，保藏号为CCTCC M 2022427。所述贝莱斯芽孢杆菌Bv20及其无细胞上清液对小核盘菌具有显著抑制作用，可用于小核盘菌引起的生菜菌核病的防治，温室盆栽试验防效达72.6％；利用贝莱斯芽孢杆菌Bv20开发的生防剂或生物农药具有很好的应用前景。

技术领域

本申请涉及植物病害生物防治技术领域，特别是涉及贝莱斯芽孢杆菌菌株及其在防治生菜菌核病中的应用。

背景技术

菌核病是生菜生产上的一种毁灭性的土传病害，是由核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)和小核盘菌(Sclerotinia minor)引起的，其所造成的平均产量损失在10％～15％，最高可达30％。虽然在我国大多数地区主要的优势种是核盘菌，但在长三角地区，近年来由小核盘菌(Sclerotinia minor)引起生菜菌核病的情况日趋严重。虽然两个病原菌是同属的真菌，但侵染寄主的方式不同。

小核盘菌能侵染100余种植物，包括莴苣、油菜和生菜等多种经济作物。小核盘菌主要以菌核的形式在土壤、病残体或混在种子中越冬，其生活史循环中约90％的时间以菌核的形态存在。菌核具有抗逆性，可在土壤中存活多年。然而，小核盘菌在自然条件下罕见产生有性阶段，即子囊盘和子囊孢子。来年后，菌核萌发产生菌丝体，以菌丝体形式侵染寄主。小核盘菌在植物的任何生长阶段均能侵染，包括苗期到成株期。在潮湿寒冷的条件下，病原菌能在侵染部位快速蔓延，形成白色絮状菌丝，严重时能导致植物萎蔫死亡，植物的病残体上通常产生大量的菌核，作为新的侵染源。

相比较，核盘菌具有更为广泛的寄主，能侵染超过400种植物，并能产生黑色无性的菌核，类似于小核盘菌。菌核在缺乏适合的寄主时以静止状态在土壤中存活多年，可作为气传病原菌或作为土传病原菌。地表菌核在适合条件下萌发，产生子囊盘，释放子囊孢子(Clarkson等，2006)，这种萌发称为产果体萌发(Carpogenic germination)。子囊孢子从子囊盘的子囊中强烈地弹射出后，被风传到整个田块或相邻的田块中，侵染地上部分植物。而地下菌核产生菌丝体直接侵染寄主，这种萌发称为产丝体萌发(Myceliogenicgermination)。然而，大量研究表明，核盘菌菌核主要是以产果体萌发方式为主，产丝体萌发不超过5％。所以，由核盘菌引起的菌核病，病害发生和流行的预测主要基于子囊孢子接种和环境因子。

显然，由于两个病原菌生物学特性和侵染寄主的差异，因而在病害防治策略上也是不同的。针对小核盘菌引起的生菜菌核病，防治上主要以防治病原菌菌丝侵染为主，而针对核盘菌引起的生菜菌核病，生产上主要以防治子囊孢子传播和侵入为主。

由于生菜生产受土地面积的限制，连作常常导致菌核病发生越来越严重，给生菜生产造成了严重的损失。虽然推广抗病品种的防治方法最为经济有效，但目前并未有完全抗病或完全免疫的品种。因此，对菌核病的防治主要依靠化学防治方法。常用的农药有多菌灵、戊唑醇、菌核净等。但由于菌核的抗逆性，不仅防治效果有限，而且易诱导病原菌抗药性的提升。而生物防治具有持效期长、对环境污染小、对农作物和人畜安全等优点。利用生物防治措施防治生菜菌核病有助于保障蔬菜的安全，减少生态污染问题，具有经济和生态双重效益。生防菌的开发和应用，将为防治生菜菌核病提供广阔的市场与前景。

目前，关于菌核病生物防治的研究多聚焦于核盘菌，发现的生防菌主要集中在盾壳霉(Coniothyrium minitans)、假单胞菌(Pseudomonas spp.)和芽孢杆菌(Bacillusspp.)等微生物，而小核盘菌的生防研究较少。针对小核盘菌菌核主要以菌丝体萌发，罕见产生子囊盘和子囊孢子这一特性，筛选能够定殖于土壤并能抑制小菌核的萌发及菌丝生长的生防菌株，用其防治由小核盘菌引起的菌核病尤为重要。

然而，外来的生防菌株在当地土壤存在适应性问题，常影响了生防菌株的生防效果。因此，从当地土壤中筛选高效生防菌株，是开发和利用生防制剂的重要方面和途径。