[发明专利]一种测定诃子中化学成分含量的方法

权利要求书

1.一种测定诃子中化学成分含量的方法，其特征在于，采用超高效液相色谱-质谱联用，测定诃子中化学成分的含量；所述化学成分包括阿江榄仁酸、山楂酸、科罗索酸、诃子次酸、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、柯里拉京、鞣花酸、没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯、原儿茶酸、诃子鞣酸、槲皮素、诃子林鞣酸、芦丁；所述方法包括：

(1)建立各化学成分的标准曲线；

以80-100vol％甲醇为溶剂，配制5-12个含有不同已知浓度的各化学成分的混合对照品溶液；其中，阿江榄仁酸浓度为1-800ng/mL；柯里拉京浓度为1-30000ng/mL；槲皮素浓度为0.4-400ng/mL；诃子次酸浓度为20-55000ng/mL；诃子鞣酸浓度为4-55000ng/mL；诃子林鞣酸浓度为10-30000ng/mL；科罗索酸浓度为0.1-800ng/mL；芦丁、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯浓度为0.2-800ng/mL；没食子酸浓度为10-30000ng/mL；鞣花酸浓度为5-30000ng/mL；山楂酸浓度为0.1-800ng/mL；1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖浓度为3-30000ng/mL；原儿茶酸浓度为2-8000ng/mL；

在相同的色谱条件和质谱条件下，将体积为V₁的各混合对照品溶液分别注入超高效液相色谱仪中，通过质谱检测，根据各化学成分的特征离子确定各化学成分的色谱峰，并获得各化学成分的色谱峰面积；

以各化学成分的色谱峰的峰面积为纵坐标，以各化学成分的浓度为横坐标，分别建立各化学成分的标准曲线；

其中，所述色谱条件包括：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相：A相为体积分数为0.05-0.15％的甲酸水溶液，B相为乙腈；采用体积分数30-97％A相，3-70％B相，梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为：0-1.5分钟，3％-5％B；1.5-3分钟，5％-25％B；3-7分钟，25％-55％B；7-8分钟，55％-70％B；8-13分钟，70％-70％B；

(2)获得供试品溶液中各化学成分的色谱峰面积；

取质量为M的供试样品，以体积为V₂的60-80vol％甲醇为溶剂进行提取，取上清液过滤后得到供试品溶液，其中，M/V₂为(1-3):10mg/mL；

在与步骤(1)中相同的色谱条件和质谱条件下，取体积为V₁的供试品溶液注入超高效液相色谱仪中，通过质谱检测，根据各化学成分的特征离子确定各化学成分的色谱峰，并获得各化学成分的色谱峰面积；

(3)确定供试品中各化学成分的含量；

根据已建立的各化学成分的标准曲线，由供试品溶液中各化学成分的色谱峰面积，分别计算出供试品溶液中各化学成分的浓度C₁，按照公式C＝C₁×V₂/M分别计算出供试品中各化学成分的含量C。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述混合对照品溶液中，阿江榄仁酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯、芦丁、山楂酸、科罗索酸浓度为1-500ng/mL；柯里拉京、诃子林鞣酸、没食子酸、鞣花酸、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖浓度为50-25000ng/mL；槲皮素浓度为0.4-200ng/mL；诃子次酸、诃子鞣酸浓度为100-50000ng/mL；原儿茶酸浓度为10-5000ng/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，以80-100vol％甲醇为溶剂，配制含有各化学成分的混合对照品储备液，所述混合对照品储备液中，阿江榄仁酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯、芦丁、山楂酸、科罗索酸浓度为500-800ng/mL；柯里拉京、诃子林鞣酸、没食子酸、鞣花酸、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖浓度为25000-30000ng/mL；槲皮素浓度为200-400ng/mL；诃子次酸、诃子鞣酸浓度为50000-55000ng/mL；原儿茶酸浓度为5000-8000ng/mL；

以80-100vol％甲醇为溶剂稀释所述混合对照品储备液，获得所述5-12个含有不同已知浓度的各化学成分的混合对照品溶液。