[发明专利]OsDUF6基因及其编码蛋白在水稻耐盐性育种中的应用

权利要求书

1.OsDUF6基因在调控水稻耐盐性中的应用，其特征在于，所述OsDUF6基因包含：

核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的DNA片段；或

与SEQ ID NO:3至少90％同源的DNA片段；或

功能相当于SEQ ID NO:3所示核苷酸序列的亚片段。

2.如权利要求1所述的OsDUF6基因编码的蛋白在调控水稻耐盐性中的应用。

3.OsDUF6基因编码的蛋白在调控水稻耐盐性中的应用，其特征在于，所述OsDUF6基因编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；或

所述OsDUF6基因编码的蛋白的氨基酸序列选自SEQ ID NO:4的同源序列、保守性变异体、等位变异体、天然突变体和诱导突变体中的一种。

4.与权利要求1所述的基因或权利要求2-3所述的蛋白相关的生物材料在调控水稻耐盐性中的应用，其特征在于，所述生物材料如下任一所示：

a)含有核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的DNA片段的表达盒，或含有与SEQ ID NO:3至少90％同源的DNA片段的表达盒；

b)含有核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的DNA片段的重组载体，或含有与SEQ ID NO:3至少90％同源的DNA片段的重组载体；优选地，所述重组载体为敲除载体、敲减载体或过表达载体；

c)含有b)所述的重组载体的重组微生物、重组细胞、转基因植物组织或转基因植株；

d)如c)所述的转基因植株的可再生细胞的产生的组织培养物或原生质体。

5.根据权利要求4所述的生物材料在调控水稻耐盐性中的应用，其特征在于，构建所述重组载体所使用的质粒为Ti质粒或植物病毒载体。

6.一种基于CRISPR/Cas9技术的OsDUF6基因敲除突变体，其特征在于，所述OsDUF6基因敲除突变体由以下步骤制备得到：

S1.设计2个sgRNA及2对靶点序列引物，所述sgRNA按照SEQ ID NO:5所示核苷酸序列进行设计，所述靶点序列引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:6-9所示；

S2.通过边切边连、重叠延伸PCR构建sgRNA表达盒并插入线性化pYLCRISPR/Cas9Pubi-H载体，农杆菌转化、筛选，即得。

7.根据权利要求6所述的所述的OsDUF6基因敲除突变体，其特征在于，所述重叠延申PCR中使用的引物核苷酸序列如SEQ ID NO:6-13所示。

8.一种具有耐盐性能的水稻的育种方法，其特征在于，筛选包含如权利要求1所述的OsDUF6基因的水稻。

9.一种具有耐盐性能的水稻的育种方法，其特征在于，构建如权利要求4所述的重组载体，并培育含有所述重组载体的转基因水稻，所述重组载体为过表达载体。

10.根据权利要求9所述的具有耐盐性能的水稻的育种方法，其特征在于，所述转基因水稻过表达如权利要求2或3所述的OsDUF6基因编码的蛋白。