[发明专利]一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法

权利要求书

1.一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，其特征在于，合成以ACE2中和冠状病毒并以ACE2靶向递送冠状病毒共有RNAi序列shRNA的ACE2siRNA，包括分别合成以冠状病毒共有保守基因为RNA干扰靶标的shRNA和以冠状病毒受体结合域RBD为配体的ACE2，然后将合成的ACE2分别连接到合成的shRNA的正反义链上，构成由ACE2和shRNA组成的ACE2siRNA，经进一步的脂质体修饰，使被ACE2靶向递送的shRNA特异性间接结合病毒RBD，形成shRNA-ACE2-RBD-病毒的复合物，使shRNA被复合物靶向递送并随着病毒的感染进入表达ACE2的靶细胞浆，起靶向病毒感染细胞的广谱抗病毒作用。

2.根据权利要求1所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，其特征在于，所述以共有保守基因为RNA干扰靶标是指用于合成shRNA的siRNA选自数据库记载的各种致病性冠状病毒及其变异毒株的共有保守基因，使合成的shRNA靶向干扰所述共有保守基因，从而起广谱抗新冠病毒变异毒株的作用；所述共有保守基因包括但不限于超保守基因、保守基因和/或由保守微卫星拼接的基因。

3.根据权利要求1、2所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，其特征在于，所述合成shRNA包括但不限于首先合成2条互补的约21-25nt的siRNA寡核苷酸多肽以及合成起间隔作用的loop环碱基序列，然后将所合成的siRNA和loop环连接成由loop环间隔成的小发夹shRNA双链，继之在shRNA双链的每条单链上各连接ACE2多肽。

4.根据权利要求1、3所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，其特征在于，所述合成shRNA的siRNA序列包括但不限于SEQ ID NO.1～58。

5.根据权利要求1、4所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，其特征在于，所述合成shRNA的siRNA序列包括但不限于新型冠状病毒共有RNAi序列SEQ IDNO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.8～10、SEQ ID NO.16～18、SEQ ID NO.20～22、SEQ ID NO.30～32、SEQ ID NO.41～58。

6.根据权利要求1、5所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，其特征在于，所述合成shRNA的siRNA序列进一步优选为靶向冠状病毒N基因的SEQ ID NO.16-18和SEQ ID NO.49-51，靶向冠状病毒ORF1ab基因的SEQ ID NO.20-22和SEQ ID NO.52-54，以及靶向冠状病毒S基因的SEQ ID NO.30-32和SEQ ID NO.56-58；所述合成shRNA的siRNA序列进一步优选为靶向N基因的SEQ ID NO.16和SEQ ID NO.49，靶向ORF1ab基因的SEQ IDNO.21和SEQ ID NO.52，靶向S基因的SEQ ID NO.30；所述合成shRNA的siRNA序列进一步优选为SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.49和SEQ ID NO.30。

7.根据权利要求1、3所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，其特征在于，所述ACE2siRNA包括将所述ACE2与所述shRNA和/或siRNA连接成化合物，或将所述shRNA和/或siRNA插入到所述ACE2多肽中间，连接成化合物，包括进而以脂质体修饰化合物。

8.根据权利要求1、7所述的一种以ACE2靶向递送shRNA的ACE2siRNA药物制备方法，其特征在于，所述ACE2包括但不限于第1-740位氨基酸的胞外ACE2、第741-763位氨基酸的跨膜ACE2、第764-805位氨基酸的胞内ACE2以及经氨基酸序列优化的ACE2多肽。