[发明专利]黄连中生物碱的检测方法在审
申请号: | 202210444175.6 | 申请日: | 2022-04-26 |
公开(公告)号: | CN114965661A | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 周华;何凡;黄虞枫;魏梅;罗文汇;戴维;瞿显友;刘良 | 申请(专利权)人: | 广东一方制药有限公司 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62;G01N1/36;G01N1/42 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 王秉丽 |
地址: | 528244 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黄连 生物碱 检测 方法 | ||
1.一种黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,所述检测方法包括以下步骤:
用包埋剂浸润待测黄连样品,冷冻,制切片;
将所述切片贴合在载片上,采用二次离子飞行时间质谱法检测所述切片中的生物碱;
其中,
所述黄连样品为黄连鲜品或者经润湿处理的黄连干品,润湿处理采用的溶剂包含水;
所述包埋剂包含聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物。
2.根据权利要求1中所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,所述包埋剂为OCT包埋剂或者所述OCT包埋剂和水的混合物。
3.根据权利要求1中所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,所述生物碱选自如下种类中的1种、2种、3种、4种、5种或者6种:小檗碱、黄连碱、巴马汀、氧化小檗碱和非洲防己碱。
4.根据权利要求1所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,所述二次离子飞行时间质谱法的质谱条件包括:
模式为聚束模式;
初级离子为Bi1+、Bi3+或者Bi32+;
能量为20keV~30keV;
离子束流为0.3pA~1pA。
5.根据权利要求4所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,所述二次离子飞行时间质谱法的质谱条件还包括:
采集面积为1×1mm2~10×10mm2;或/和,
采集像素为32×32pixel2~1024×1024pixel2;或/和,
横向分辨率为3μm~8μm;或/和,
次级离子的种类为正离子;或/和,
次级离子的质量为0amu~2058amu;或/和,
束流的入射角度为40°~50°;或/和,
初级离子剂量保持在1.25×109离子/cm2以下。
6.根据权利要求1至5任一项所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,制切片的温度为-20℃~-24℃。
7.根据权利要求1至5任一项所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,冷冻的条件包括:温度为-15℃~-25℃,时间为20min~40min。
8.根据权利要求1至5任一项所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,所述切片的厚度为5μm~20μm。
9.根据权利要求1至5任一项所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,所述待测黄连样品为0.4cm~0.6cm长的黄连横切段。
10.根据权利要求9所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,制切片的过程中,沿所述黄连横切段的径向进行切片。
11.根据权利要求1至5任一项所述的黄连中生物碱的检测方法,其特征在于,所述载片为硅片或者云母片。
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