[发明专利]藜麦甲硫氨酸亚砜还原酶基因CqMSRA5.1及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 202210438886.2 | 申请日： | 2022-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN114686499A | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 丁鹏程;李小芬;崔开源;任爱霞;林文;武祥云;孙敏;高志强 | 申请（专利权）人： | 山西农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N15/70;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 太原万惟新致知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14121 | 代理人： | 黄海燕 |
| 地址： | 030801 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甲硫氨酸 亚砜 还原酶 基因 cqmsra5 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种藜麦甲硫氨酸亚砜还原酶基因CqMSRA5.1，其特征在于，所述CqMSRA5.1基因的cDNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.权利要求1所述藜麦甲硫氨酸亚砜还原酶基因CqMSRA5.1的制备方法，包括步骤：
S101. 提取藜麦稼祺505总RNA并以总RNA反转录获得总cDNA；
S102. 以CqMSRA5.1-F、CqMSRA5.1-R为引物，以反转录获得的总cDNA为模板进行PCR扩增，得到目标片段；其中，CqMSRA5.1-F序列如SEQ ID No.2所示、CqMSRA5.1-R序列如SEQ IDNo.3所示；
S103. PCR产物经凝胶回收、载体连接、大肠杆菌转化，测序得到藜麦甲硫氨酸亚砜还原酶基因CqMSRA5.1。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S103中，所述PCR的扩增体系为：
总cDNA 1µl 10×Buffer 2µl dNTP(2.5mM each) 0.4µl CqMSRA5.1-F引物F(10µM) 0.5µl CqMSRA5.1-R引物R(10µM) 0.5µl TransTaq HiFi DNA聚合酶 0.2µl 补充双蒸水至 20µl。
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