[发明专利]SARS-CoV-2抗原检测试纸条

说明书

本发明公开用于新型冠状病毒感染的检测试纸条。具体的是用该组抗体制备成胶体金试纸条来检测新冠病毒的感染。通过克隆、表达纯化原型株RBD‑SD1重组蛋白，制备并纯化单克隆抗体，利用胶体金对4C4#单克隆抗体标记，制备金标垫，组装试纸条,在醋酸纤维素膜上包被7H1#单克隆抗体作为检测线、兔抗鼠抗体作为质检线。制备的新冠病毒感染检测胶体金试纸条具有便于操作、快捷、不需要特殊仪器等特点，检测结果清晰，适合于临床现场的快速诊断和疫区等大规模流行病学调查，同时作为核酸检测手段的辅助。

技术领域

本发明涉及医药领域和疾病检测领域，具体涉及新型冠状病毒原型株S蛋白的检测抗体及检测试纸条。

背景技术

新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019，COVID-19)是由一种新的β冠状病毒-新型冠状病毒(SARS-CoV-2病毒)引起新型冠状病毒肺炎简称“新冠肺炎”，是指2019新型冠状病毒（COVID-19，SARS-CoV-2）感染导致的肺炎。

新冠病毒的防治是目前全世界的头等大事。目前对新冠病毒虽然有灭活疫苗，重组蛋白苗的上市作为预防手段，但是最有效的方法是隔离和监测。而新冠病毒目前以核酸检测为主,利用荧光定量PCR方法，然而，由于采样部位和操作手法的差异，常常出现漏检的情况，比如咽拭子、鼻拭子或者肛拭子，都在一定程度上给待检人员带来生理上的不舒服，并不具有用户友好性。临床上亟需有其他有效的检测方法作为辅助检测方法。

此外，对一些流动人群聚集地，大规模筛查的时候，人员聚集，设备超负荷运转等也限制核酸检测方法的发展。而使用胶体金法则因为其简便快速，适合大规模筛查。新冠病毒(SARS-CoV-2)有四种主要的结构蛋白：刺突蛋白（Spike protein，S蛋白），核衣壳蛋白（Nucleocapsid，N蛋白），膜蛋白（Membrane protein，M蛋白），包膜蛋白（Envelopeprotein，E蛋白）。目前上市的几款抗原检测试剂盒，多针对N蛋白的检测，对S蛋白的检测并不多，尤其对于S蛋白的RBD区域的检测更是少之又少。因此筛选适合S蛋白检测的抗体是很重要的，基于筛选抗体组成的胶体金试纸条也具有很强大的市场开发前景。

胶体金试纸条的实验原理类似于双抗夹心法。在吸水材料的牵引下，待测抗原在试条上向上走，首先与金标抗体结合成抗原抗体复合物，抗原抗体复合物上行到检测线时，被测抗原的另一结合位点与包被在此处的单抗（T线抗体）结合，形成两个抗体结合一个抗原（双抗体夹心）的金标复合物，因有金颗粒在此沉积，故检测线显红色。未结合抗原的金标抗体上行到对照线时，与抗金标抗体结合，所以对照线也显红色。待测标本中无被测抗原，测试条上只有金标抗体上行并与对照线处的抗体（C线抗体）结合，使金颗粒沉积在此处而显红色。

发明内容

本发明的目的是公开一组检测新冠肺炎感染的抗体以及该组抗体制备的检测试纸条,提供了除了核酸检测之外的利用胶体金法检测新冠病毒抗原的辅助手段。

本发明首先研究得到针对新型病毒RBD 区域结合SD1序列的9株单克隆抗体：1G1，4C4，5B9，6D11，7C4，7H1，7H9，8B5，8D1。其目的是为得到中和抗体,但在后续进一步研究中却发现其中4C4和7H1两个结合单抗配对组合特别适合于制备胶体金试纸，具有非常好的效果，极具应用价值，由此完成本发明。

因此，本发明提供一种检测新冠病毒肺炎的试试纸条，其特征在于，其包括4C4#单抗和7H1#单抗，其中，所述4C4#单抗的轻链可变区中CDR1：SKSVSTSGYS(SEQ ID NO:1)，CDR2：YRA(SEQ ID NO:2)，CDR3：CMQSMEELT(SEQ ID NO:3)；重链可变区中CDR1：SGFSLTSY(SEQ ID NO:4)，CDR2：VIWAGGS(SEQ ID NO:5)，CDR3：CARDYYGPFDY(SEQ ID NO:6)；