[发明专利]一种作物菌核病病原菌核盘菌田间接种及抗性鉴定方法

说明书

本发明属于作物病害抗性鉴定技术领域，具体涉及一种作物菌核病病原菌核盘菌田间接种及抗性鉴定方法。本发明利用针状物连接纸板和载菌粮食颗粒形成接种体，将接种体穿刺接种在作物茎秆上，使载菌粮食颗粒和茎秆接触，本发明的方法能够实现快速、精准接种。本发明的核盘菌田间接种方法集多重保湿、微创伤、高活力病原菌为一体，且该方法操作简单、快速，接种部位灵活，可以精确定株定向，接种效率高，比传统的接种方法工效提高48.75％，质量高，接种成功率在90％以上，比传统的接种方法在喷水保湿和不保湿的情况下分别提高56.14％和120.05％，既适合大规模接种的需要，又具有其它接种方法所不具有的优点。

技术领域

本发明属于作物病害抗性鉴定技术领域，具体涉及一种作物菌核病病原菌核盘菌田间接种及抗性鉴定方法。

背景技术

植物菌核病是一种由核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)寄生引起的严重的真菌性病害。核盘菌是世界性分布的重要植物病原菌，是一种兼性寄生真菌，其地理分布、寄主范围十分广泛，在五大洲近100多个国家皆有发现或流行，据统计其寄主植物己达75个科，278个属的408个种和42个亚种或品种的植物，并呈蔓延和增加的趋势。核盘菌引起的病害对重要经济作物油菜、向日葵和大豆等的产量和品质构成严重威胁。

目前，传统的植物菌核病防治措施主要依赖于化学防治，忽略了以农业生态系统为整体对象和自然控制因素的作用。农业生态调控技术的一项重要措施就是培育、筛选和利用品种的抗性，研究表明，品种或种质对菌核病的抗性变异是广泛存在的，因此选育和利用抗病品种对控制该病害的发生和流行具有重要的意义。

在对作物菌核病的抗性研究中，对所鉴种质品种进行人工接菌诱发病害发生是品种抗性鉴定筛选不可缺少的手段和方法，而接种方法对抗性评价结果的可靠性至关重要，一套简单、易行、准确的鉴定方法尤其是适合大规模筛选作物种质资源的抗性鉴定方法，是开展抗作物菌核病育种工作的基础。在常规接种鉴定筛选方法上，分为室内接种鉴定和田间接种鉴定。室内接种鉴定操作简单易行，但鉴定结果与田间真实抗性水平相关性较小。田间接种鉴定反映了田间的实际情况，与自然生产条件一致，因而是抗病材料、品种、种质资源等高级鉴定中所必须采取的方法。田间接种鉴定分为苗期、开花期接种鉴定，目前主要采用开花期接种鉴定。田间接种方法有菌碟接种法、牙签接种法、菌丝子囊孢子喷雾法和种菌核法，这几种接种方法中结果虽然在一定程度上能表达抗病品种和感病品种的差异，但是其都有各自的局限性。菌碟接种法人工操作难度较大，费工费时，接种后菌碟易干病原菌失去活性且易脱落，致使接种失败；牙签接种法对作物造成的创伤较大，不能真实反映材料的抗性水平，且操作复杂；菌丝子囊孢子喷雾法和种菌核法均受一些条件的限制，接种鉴定不稳定，不适合大规模接种鉴定。目前，缺少一种既能便于操作，又能稳定鉴定作物菌核病。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种作物菌核病病原菌核盘菌田间接种及抗性鉴定方法，本发明的方法不仅操作简便，而且能稳定鉴定作物菌核病。

本发明提供了一种作物菌核病病原菌核盘菌田间接种方法，包括以下步骤：将针状物穿透纸板和载菌粮食颗粒后，再将针状物插在待接种作物茎秆阴面，使载菌粮食颗粒和茎秆接触；所述载菌粮食颗粒的表面负载有核盘菌。

优选的，所述针状物包括大头针。

优选的，所述纸板的形状为方形，每个所述纸板的长度为1.2～1.5cm、宽度为1.2～1.5cm、厚度为0.3～0.5cm。

优选的，所述载菌粮食颗粒包括载菌小麦粒。

优选的，所述穿透载药粮食颗粒为从载菌小麦粒的腹沟中间穿过。

优选的，所述针状物插在待接种作物茎杆上的深度为0.5～0.8cm。