[发明专利]多肽及其在制备拮抗野生型p53与MDM2结合的抗癌药物中的应用

说明书

本发明属于鼻咽癌药物领域，具体公开了一种抗鼻咽癌的p53‑MDM2拮抗多肽药物，其是具有式1结构式的化合物。本发明还公开了所述的抗鼻咽癌多肽及其衍生多肽(具有式2结构式)作为抗鼻咽癌转移药物的应用。本发明中式1和式2化合物在抗鼻咽癌转移方面具有出人意料的效果，能够抑制鼻咽癌细胞在体内外转移和侵袭。

技术领域：

本发明涉及生物技术和生物医药领域，具体涉及抗肿瘤化疗药物。

背景技术：

鼻咽癌(NPC)是中国南方地区的主要癌症。在我国广东省成年人中，鼻咽癌是最常见的恶性肿瘤，因该地鼻咽癌的发病率每年达到80例/100000人，NPC也被称为“广东癌症”。NPC发生的解剖位置隐蔽且常无特定症状，因此患者多在初诊为NPC时就发现伴随转移。在确诊时，60％的患者伴有淋巴结转移，4.2％的患者有远处转移。鼻咽癌主要采用放射治疗，常根据疾病不同阶段联合化疗。尽管NPC对放化疗敏感，但放疗作用区域局限，而常规化疗药物(如顺铂、5-FU等)作用于所有细胞，对正常细胞也有很大损伤。伴有转移病灶的NPC病人接受常规治疗后不良反应明显，预后仍较差。

因此，发掘特异性靶向癌细胞独特分子特征，抗肿瘤功效更大且毒性更低的新药是鼻咽癌药物研究的主要目标。

NPC发病涉及多个基因及信号通路的变化，p53就是关键基因之一。p53基因位于17号染色体(17p13.1)上，翻译出具有393个氨基酸的蛋白质。野生型(wt)p53在保护细胞免于癌变方面具有重要的生物学作用。p53能维持基因组稳定性，以自然方式清除DNA受损细胞，调节细胞中G1-S期的转变并防止基因畸变。MDM2蛋白是p53蛋白稳定性和活性的主要调节因子，它通过E3-泛素连接酶活性调控p53,可拮抗p53的肿瘤抑制作用。细胞应激、DNA损伤或致癌基因的激活等可使p53-Mdm2复合物的解离，这导致p53从与Mdm2结合中游离出来，p53蛋白被激活。p53的降解受到抑制，导致其半衰期延长至数小时，并在细胞中累积。p53的突变会改变其DNA修复能力，从而导致癌症发展。在人类肺癌、结肠癌、头颈癌的早期阶段p53突变很常见，但在NPC中p53罕见突变，因此，可以通过恢复p53介导的肿瘤抑制作用来治疗NPC。

发明内容：

为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的第一目的在于提供一种多肽，旨在提供一种能够特异性和MDM2结合的抗肿瘤的多肽。

本发明第二目的在于提供所述的多肽的应用以及包含所述多肽的药物。

一种多肽，为具有式1和/或式2结构的化合物及其溶剂化合物、药学上可接受的盐；

本发明式1所述的多肽也称为多肽LP8(本发明也简称LP8)，所述多肽LP8氨基酸残基序列为LPDWHIPV。式2所述的融合多肽也称为TAT-LP8，氨基酸残基序列为YGRKKRRQRRRLPDWHIPV。所述融合多肽TAT-LP8含有多肽Ⅰ和多肽Ⅱ，所述多肽Ⅰ为HIV-TAT蛋白转导域，其作用是跨膜传递；多肽Ⅰ的C-末端与多肽Ⅱ的N-末端的氨基酸缩合形成肽键。

本发明所述的多肽，其能够选择性与MDM2结合，例如可与p53竞争性结合MDM2使p53-MDM2复合物减少，促使细胞内游离p53蛋白增加，在靶向抑制肿瘤细胞例如鼻咽癌细胞转移、侵袭方面起着重要作用，在NPC靶向治疗方面具有巨大的应用价值。本发明所述的p53例如为野生型p53蛋白。

本发明所述的多肽，可基于现有的氨基酸合成方法制备，且其具有良好的溶解性能，例如，可采用PBS溶解，有利于其利用。

本发明还提供了所述的多肽的应用，将其用于制备和MDM2结合的药物。

本发明优选的应用，所述的多肽为p53-MDM2拮抗多肽，可将其用于制备与p53竞争性结合MDM2拮抗p53-MDM2的药物。