[发明专利]一株产葡萄糖醛酸的季也蒙毕赤酵母及应用

说明书

本发明公开了一株高产葡萄糖醛酸的季也蒙毕赤酵母及应用，所述季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)于2022年1月27日保藏至广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:62236；所述季也蒙毕赤酵母在以绿茶、蔗糖为底物发酵制备的康普茶中，测定发酵过程中葡萄糖醛酸含量，发现葡萄糖醛酸含量最高可达2.75g/L，采用纯菌发酵生产康普茶时，不仅能获得典型风味的康普茶，还能显著提高其功能性成分含量。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体是一株产葡萄糖醛酸的季也蒙毕赤酵母及应用。

背景技术

康普茶（Kombucha），又名红茶菌，海宝，是以糖茶水为主要发酵原料，经微生物发酵而成的功能性饮料。源自我国渤海地区，公元414年传入日本，随着贸易路线的扩大，随后传入苏联、东欧和德国等地，在世界范围内广泛传播。康普茶内含有多种代谢产物、茶叶浸出物以及活的微生物，使得康普茶具有多种保健功能，如调节胃肠道健康、促进消化、提神、抗癌、降血糖、降血脂及保肝、预防心血管疾病、提高免疫、缓解风湿、痛风和痔疮等功能。现已确定康普茶中的主要功能性成分为葡萄糖醛酸(Glucuronic acid)，又称葡糖醛酸。它是康普茶中最关键、最有健康价值的成分，是康普茶的解毒抗癌功能因子，也是人体肝脏内最主要的解毒物质之一，可降低肝淀粉酶活性，增加肝糖原含量，减少贮存的脂肪，起保护肝脏和解毒的作用。

当前康普茶多以自然的多菌株共同发酵生产为主，不仅生产周期长，且功能性成分葡萄糖醛酸含量较低，大概在0.003-0.01 g/L。而且自然发酵的康普茶中，大部分微生物会形成菌膜，如果将生产进行规模化工业生产，菌膜的产生将会导致设备、管道的清洗困难，也不便于管道的输送，影响了产品的规模化生产。同时多菌株的自然发酵，对菌种的组成不可控，这将导致产品存在一定的生物安全隐患，不利于产品品质的稳定。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一株产葡萄糖醛酸的季也蒙毕赤酵母及应用，在获得具有典型风味的康普茶的同时，还能提高康普茶中功能性成分葡萄糖醛酸含量。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一株产葡萄糖醛酸的季也蒙毕赤酵母，所述季也蒙毕赤酵母 （Pichia guilliermondii）于2022年1月27日保藏至广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No : 62236。

进一步的，所述季也蒙毕赤酵母从康普茶中筛选得到。

进一步的，从康普茶中筛选所述季也蒙毕赤酵母的方法包括以下步骤：

S1、菌株筛选

采用YPD及HS固体培养基对微生物进行筛选；取自然发酵康普茶发酵液，加入无菌水中按照浓度梯度依次稀释，在无菌环境下采用涂布法进行试验，每个浓度梯度培养三个平板，进行涂布培养，置于恒温箱中培养，挑选长势良好的单菌进行划线培养2-3次。

 S2、菌株发酵性能分析

将S1中筛选出的30株菌株传代稳定后，接种到茶糖水培养基中发酵10 d，测定发酵过程中的葡萄糖醛酸含量。根据发酵性能结果，将高产葡萄糖醛酸的菌株进行鉴定。

S3、菌株鉴定

结合菌株发酵性能结果，提取菌株DNA，并将PCR扩增产物送至上海生工进行测序，测序结果通过NCBI中的BLAST程序进行同源性比对分析，得到一株高产葡萄糖醛酸的季也蒙毕赤酵母 （Pichia guilliermondii）。

S4、活化培养