[发明专利]基于不换相衍生的快速检测食品中氯酞酸及草芽畏的方法

说明书

本发明提供了一种基于不换相衍生的快速检测食品中氯酞酸及草芽畏的方法,通过本发明的技术方案，针对样品前处理过程分析物容易损失的特点，发明了在样品前处理过程中不置换溶剂相（以下简称不换相），衍生后直接进样的技术，同时结合三重四极杆串联质谱仪的多反应监测（MRM）模式，建立了氯酞酸和草芽畏的快速检测方法。相对于常规的甲酯化衍生技术，不换相衍生进样技术大大简化了检验流程，缩短了检验时间，提高了检测效率；同时本检测方法灵敏度高，选择性好，在蔬菜水果、粮谷、乃至茶叶、调味品等复杂基质中，氯酞酸和草芽畏的定量限均可达到0.01 mg/kg，满足国标的要求。

技术领域

本发明涉及农残检测领域，具体而言，特别涉及一种基于不换相衍生的快速检测食品中氯酞酸及草芽畏的方法。

背景技术

氯酞酸和草芽畏属于酸性农药，我国新发布并实施的GB 2763-2021增加了氯酞酸和草芽畏两种农药，对蔬菜、水果等多种植物源性食品制定了临时限量，均为0.01 mg/kg，但目前还没有氯酞酸和草芽畏的残留检测标准方法。

文献中酸性农药的检测主要有两种技术路线：一种是采用液相色谱-串联质谱法（LCMSMS法）检测；不过在所查询的文献中均未发现氯酞酸和草芽畏这两种化合物。氯酞酸和草芽畏属于极性化合物，尤其是氯酞酸，分子结构上带两个羧酸基团，极性非常大，不仅在C18反相键合柱上无保留，在专门针对极性化合物的T3等色谱柱上保留也很弱，极容易受到共流出样品基质的干扰；同时由于氯酞酸和草芽畏的分子量小，其结构中主要是苯环，碎片离子响应非常弱，采用LCMSMS方法检测无法满足0.01 mg/kg的痕量检测要求。

另一种是采用前处理衍生，气相色谱-质谱法检测，典型的标准方法为《SN/T2228-2008 进出口食品中31种酸性除草剂残留量的检测方法 气相色谱-质谱法》，文献方法为《气相色谱-质谱法测定茶叶中29种酸性除草剂的残留量》；现有标准方法和文献方法均采用石墨化炭黑固相萃取柱或弗罗里硅土固相萃取柱等进行净化，需要配合氮吹浓缩和旋转蒸发浓缩等溶剂转换步骤，实现对目标化合物的浓缩，同时将提取用极性溶剂转化为可直接进样的非极性溶剂或中等极性。本发明发现，氮吹和旋转蒸发等溶剂转换步骤会对氯酞酸回收率的影响均比较大，其中旋转蒸发步骤可导致氯酞酸损失约55%，氮吹浓缩步骤可导致氯酞酸损失约69%，如果同时叠加提取等步骤的损失，前处理整体损失会更大，回收率会更低，不能满足实际样品0.01 mg/kg水平的检测需要。因此，直接参考现有标准方法及文献方法不能实现对氯酞酸痕量检测。

专利方法《一种同时测定谷物中四种苯甲酸类除草剂的气相色谱法》中目标化合物中包括氯酞酸和草芽畏，不过该方法采用GC-ECD法进行检测，方法的灵敏度和专属性不高，尤其是茶叶、调味品、植物油等复杂基质，检测定量限难以满足0.01 mg/kg的限量要求；同时提取溶剂使用了易制毒试剂丙酮，增加实验室管理风险。

综上所述，目前迫切需要建立一种针对氯酞酸和草芽畏的高灵敏度的快速检测方法。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明提供了一种基于不换相衍生的快速检测食品中氯酞酸及草芽畏的方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：一种基于不换相衍生的快速检测食品中氯酞酸及草芽畏的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1称样：称取样品到50 mL离心管，加入10 mL 提取试剂混匀；

S2提取：加入10 mL提取溶剂，振荡提取；

S3衍生：取2mL上清液至另一15 mL离心管，加入100 µL三甲基硅烷化重氮甲烷衍生溶液，混匀，盖塞，置于30 ℃水浴30 min；加入100 µL 2 mol/L的乙酸乙腈溶液，混匀；静置10 min；

S4净化：加入0.1 g碳酸氢钠和0.5 g无水硫酸镁，振摇，离心；移取约1.5 mL的上清液过HLB SPE柱(3cc, 60mg)，收集洗脱液；

S5分析：过0.22 µm尼龙滤膜至进样小瓶，进入气相色谱-三重四极杆质谱联用仪GCMSMS分析。