[发明专利]检测血液样本中镁离子的反应液、干试纸及其制备方法

说明书

本发明涉及一种检测血液中镁离子的干试纸及其制备方法，所述干试纸依次包括上支持层，扩散层，沉淀层，遮光层，反应层，下支持层；所述遮光层为经十二烷基聚乙二醇醚水溶液涂布的无纺布；所述反应层经过反应液处理，所述反应液包括A组分和B组分，所述A组分包括10KU～25KU过氧化物酶、3.6KU～10KU甘油‑3‑磷酸氧化酶，0.3g～2g甘油，2g～4g三磷酸腺苷，5KU～12KU甘油激酶的TES缓冲溶液；所述B组分包括0.04g～0.1g DAOS和0.04g～0.1g 4‑AAP的TES缓冲溶液。本发明所述干试纸能够最大程度地减低红细胞的影响，直接检测血液中的镁离子浓度，且检测结果准确，特异性高。

技术领域

本发明属于体外检测技术，涉及到一种检测血液样本中镁离子的反应液、干试纸及其制备方法。

背景技术

镁是一种在生物体内广泛存在的一种金属离子，是影响各种酶活性的必需离子。其在舒张血管、凝血和保护血脑屏障(BBB)的三个关键生理机制中显得非常重要，这使得对镁的测定成为重要的临床诊断项目。目前测定镁离子的方法一般有离子选择电极法、原子吸收光度法(AAS)、分光光度法、染料比色法等。其中AAS法的特异性最好，最准确，但价格仪器价格昂贵，不易自动化操。染料比色法一般是在碱性环境下，基于染料与镁离子结合而发生颜色改变建立的，但该方法容易受pH变化的影响，且容易受到其他阳离子等的干扰，在增加稳定性过程中，甚至需要加入剧毒剂氰化物。

使用干试纸法测定镁离子的方法具有简单便捷的优势。已存在的干试纸测定镁含量的方法，通常是在一定条件下，镁与染料络合剂中的染料络合形成有颜色的络合物，该方法简单，但一样容易受其他物质如钙等干扰，且目前这种方法多使用血清或血浆进行测定，测定前需要对样本进行处理，操作不便捷性给临床使用带来了不便。

专利US5397710公开了一种用于全血的干测试片，具有分离血细胞的功能。该方法使用了络黑T、偶氮胂Ⅰ、羟基萘酚蓝等染料为指示剂实现定量检测，然而，染料变色会受到诸多因素的干扰，比如钙等其他离子，虽然方法中添加了掩蔽剂GEDTA，但若要在干扰物质浓度高时达到掩蔽作用，势必需要加入大量的掩蔽剂。大量的掩蔽剂存在下，在未进行与镁的染色之前，就能观察到较高水平的染色。也就是说，该方法存在背景信号值高的缺陷，在待检测样本中镁离子浓度较低时，使得检测是准确性堪忧。且染料显色的特异性较差，消除所有干扰来实现特异性识别待检测物质是较为困难的。

专利CN1168977A申请了题为“用于测定生物体液中镁的测试片”，发明了一种用于测定生物体液中镁的测试片，该测试片提供的一种表现出低背景值的镁测试方法，在整个测定范围内具有非常好的测定准确度，不受钙等的干扰，且具有较好的储藏稳定性。测试片试剂成分主要为邻甲酚酞配位酮、离子型去污剂等，测试片包含具有检测区的不透水支持体，其中检测区含有样品保留层和粘合层。但遗憾的是，该发明无法应用于未经前处理的全血样本。因为全血样本中含有血细胞，一般对测试效果的影响很大。

有些检测试纸，通过反应基层、反应层、滤血层和吸样层构成的一个虹吸体系，这种结构具有一定的抗干扰能力，进一步保证了快速检测样本的需求。但这种结构的试纸在进行光信号检测时，无法消除位于滤血层中血细胞的红色对检测光的影响，使得检测信号受到干扰，影响最终的检测结果准确性。

发明内容

基于此，本发明的目的之一是提供一种检测全血样本中镁离子的干试纸，该试纸条能够最大程度地减低红细胞的影响，不仅能够检测血清、血浆，还能直接检测全血样本中的镁离子浓度，且检测结果准确，特异性高。

实现上述目的的技术方案如下。

一种检测血液样本中镁离子的干试纸，依次包括上支持层，扩散层，沉淀层，遮光层，反应层，下支持层；

所述遮光层为经质量体积比1g/100ml～2g/100ml的十二烷基聚乙二醇醚水溶液涂布过的无纺布；