[发明专利]一种靶向抑制KIAA1429基因表达的ShRNA在慢性髓细胞白血病中的应用

说明书

本发明公开了一种靶向抑制KIAA1429基因表达的ShRNA在制备治疗慢性髓细胞白血病药物疗中的应用。所述靶向抑制KIAA1429基因表达的ShRNA是以KIAA1429基因中SEQ ID NO.1所示核苷酸序列为靶点设计的核酸分子，所述的核酸分子为SEQ ID NO.2‑3所示的ShRNA‑1或SEQ ID NO.4‑5所示的ShRNA‑2，本发明提供的针对靶向抑制KIAA1429基因表达的ShRNA通过细胞和动物实验，证实其能抑制KIAA1429基因表达，并在抑制慢性髓细胞白血病细胞的增殖、转移等多方面具有显著效果，具有潜在的克服Imatinib耐药性的价值，为慢性髓细胞白血病的临床治疗提供新的靶向治疗药物。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种靶向抑制KIAA1429基因表达的ShRNA及其在慢性髓细胞白血病中的应用。

背景技术

慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)是一种起源于骨髓多能造血干细胞的恶性克隆性骨髓增生性疾病，以成熟髓系细胞的异常增殖为主，在我国发病率高，约占成年人白血病的20％，Bcl/Abl融合基因是其特征及关键致病基因。目前CML治疗主要包括骨髓移植、基因治疗、免疫治疗和分子靶向药物治疗等。但分别存在着费用高、成功率低、副作用大等问题亟待解决，目前使用最广泛的酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)，如Imatinib，也存在约1/5的CML患者耐药，疗效不佳疾病则可能进一步恶性进展，出现急变，预后极差。目前CML演变及TKI耐药性阻碍着彻底治愈CML最终理想的实现。因此，深入研究CML恶性进展演变机制，寻找新的靶点和治疗方向，将更好的提高治疗效果，改善患者的生存质量。

表观遗传学是血液肿瘤的重要推动因素，N6-甲基腺苷(m6A)甲基化是真核生物mRNA中最常见的修饰，据报道，m6A修饰血液系统恶性肿瘤起重要调控作用，可能成为血液肿瘤分子诊断及治疗靶标。KIAA1429是m6A甲基转移酶，位于人染色体8q22.1，是一种介导m6A修饰的复合物(WMM)的主要成分，为m6A甲基化的关键调节因子，是目前发现的甲基转移酶复合体中分子量最大的蛋白，可以以依赖或不依赖m6A甲基化的方式，调控RNA剪接、出核运输、加工、翻译及稳定性，进而影响肿瘤、生殖、生物节律等多种生物学功能。已有研究显示KIAA1429表达异常与肝癌、胃癌、乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌、睾丸生殖细胞瘤等多种癌症类型的不良预后密切相关，KIAA1429高表达参与并促进癌症进展，在这些癌症类型中观察到明显的致癌作用，提示KIAA1429可能是癌症治疗中潜在的治疗靶点。但目前，KIAA1429在CML的发生发展及耐药中的作用及机制国内外尚未见报道。

发明内容

鉴于现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种靶向抑制KIAA1429基因表达的ShRNA及其在制备治疗CML的药物中的应用。本发明通过利用RNA干扰技术，设计并合成一种特异性抑制KIAA1429基因的ShRNA。上述ShRNA可以特异性地抑制靶基因KIAA1429的表达，从而抑制CML细胞的增殖、转移和Imatinib耐药，达到CML的基因靶向治疗的目的。本发明经试验和数据分析，KIAA1429基因在CML急变期患者中高表达，抑制CML细胞中KIAA1429基因的表达可以抑制细胞的增殖、转移和Imatinib耐药。本发明通过构建一种靶向抑制KIAA1429基因表达的ShRNA可以用于CML治疗试剂的开发。KIAA1429基因的靶向抑制ShRNA在CML基因治疗与分子靶向治疗领域将发挥重要作用，为CML的临床治疗提供新的靶向治疗药物。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案。

本发明提供了一种靶向抑制KIAA1429基因表达的ShRNA，所述ShRNA是以KIAA1429基因中SEQ ID No.1所示核苷酸序列为靶点设计的核酸分子。

进一步，所述ShRNA为ShRNA-1或ShRNA-2，所述ShRNA-1包含正义链：