[发明专利]DNA病毒核酸提取检测试剂、试剂盒及其方法和应用有效
| 申请号： | 202210351200.6 | 申请日： | 2022-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN114591945B | 公开（公告）日： | 2022-12-06 |
| 发明（设计）人： | 夏涵;官远林;付健;尚芳娟;王鹏军;杨书恒;李长诚;佟斯垚 | 申请（专利权）人： | 予果生物科技（北京）有限公司;西咸新区予果微码生物科技有限公司;予果智造科技（北京）有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 西安鼎迈知识产权代理事务所(普通合伙) 61263 | 代理人： | 李振瑞 |
| 地址： | 102600 北京市大兴区北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | dna 病毒 核酸 提取 检测 试剂 试剂盒 及其 方法 应用 | ||
1.一种DNA病毒核酸提取检测方法，其特征在于，所述的提取检测方法包括如下步骤：
(1)将含有病毒样本离心沉淀，参数为10000-14000rpm，移除上清；
(2)加入核酸提取检测试剂到步骤(1)得到的菌落沉淀物，所述提取检测试剂由InstaGene Matrix、Tris-HCl、SDS、KCl、EDTA和Sarkosyl组成，所述InstaGene Matrix的质量浓度为1％-15％；Tris-HCl物质的量浓度为10m mol/L-100mmol/L，pH为8.0；SDS的质量浓度为1％-20％；KCl物质的量浓度为10m mol/L-100m mol/L；EDTA物质的量浓度为1mmol/L-10mmol/L；Sarkosyl的质量浓度为1％-5％；震荡混匀；之后将混合物置于沸水浴中，放置5-10分钟，之后室温冷却1-3分钟；
(3)将裂解产物高速离心沉淀，参数为10000-14000rpm；
(4)取上清液，用于后续的质量控制与目标基因检测；
所述提取检测方法还包括：所述引物设计与合成、qPCR扩增、qPCR检测与结果分析。
2.根据权利要求1所述的一种DNA病毒核酸提取检测方法，其特征在于，所述提取检测方法还包括：打断与建库、上机测序、数据分析。
3.根据权利要求1所述的一种DNA病毒核酸提取检测方法，其特征在于，所述提取检测试剂制备好后高压灭菌并置于4℃长期保存以备使用。
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