[发明专利]酰胺高丝氨酸内酯受体-增强绿色荧光融合蛋白及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202210338602.2 | 申请日： | 2022-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN114751990B | 公开（公告）日： | 2023-10-20 |
| 发明（设计）人： | 俞汉青;李宇昇 | 申请（专利权）人： | 中国科学技术大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;G01N33/64;G01N33/58;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 温可睿 |
| 地址： | 230026 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酰胺高 丝氨酸 内酯 受体 增强 绿色 荧光 融合 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
1.融合蛋白，其包括酰胺高丝氨酸内酯受体、linker和增强绿色荧光蛋白；其中，所述酰胺高丝氨酸内酯受体ainR来自费氏弧菌(Vibrio fischeri)。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，
所述酰胺高丝氨酸内酯受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；
所述增强绿色荧光蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；
所述linker为刚性linker或柔性linker，其至少由15个氨基酸残基组成。
3.根据权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
4.编码权利要求1～3任一项所述融合蛋白的核酸。
5.根据权利要求4所述的核酸，其特征在于，所述核酸的序列如SEQ ID NO:4所示。
6.含有权利要求4或5所述核酸的表达载体。
7.转化或转染权利要求6或7所述表达载体的重组宿主。
8.权利要求1～3任一项所述融合蛋白的制备方法，其特征在于，培养权利要求6或7所述重组宿主，诱导所述融合蛋白的表达。
9.一种酰胺高丝氨酸内酯抑制物的检测试剂，其特征在于，包括如下I)～IV中的任一项：
I)、权利要求1～3任一项所述融合蛋白；
II)、权利要求10所述制备方法制得的融合蛋白；
III)、权利要求6或7所述重组宿主；
IV)、权利要求6或7所述重组宿主的培养产物。
10.一种酰胺高丝氨酸内酯抑制物的检测方法，其特征在于，使如下I)～IV中的任一项与待测物接触，根据荧光情况判断待测物是否具有抑制作用：
I)、权利要求1～3任一项所述融合蛋白；
II)、权利要求10所述制备方法制得的融合蛋白；
III)、权利要求6或7所述重组宿主；
IV)、权利要求6或7所述重组宿主的培养产物。
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