[发明专利]一种二硬脂酰磷脂酰胆碱纯度的检测方法

说明书

本发明提供了一种二硬脂酰磷脂酰胆碱纯度的检测方法，通所述检测方法包括以下步骤：溶解二硬脂酰磷脂酰胆碱，采用高效液相色谱法进行检测，采用以丁基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱；本发明的流动相的有机相为甲醇‑乙腈，水相为三氟乙酸水溶液，三氟乙酸与水的体积之比为(0.1～0.3)：100；该方法操作便捷，且分离良好，通过高低浓度法进行有效控制产品的纯度，该方法在定量性、线性范围、重复性、回收率等方面符合标准，且具有较高耐用性。

技术领域

本发明涉及化学品分析技术领域，具体是一种二硬脂酰磷脂酰胆碱纯度的检测方法。

背景技术

磷脂酰胆碱(PC)，又称卵磷脂或胆碱磷脂，是生命活动的基础物质。它与其它磷脂成分如磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酸(PA)与肌醇磷脂(PI)等，以混合物形式广泛存在于动植物和人的细胞膜与卵细胞中。脂质体(liposome)是一种人工膜，在水中磷脂分子亲水头部插入水中，脂质体疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体。脂质体是一种定向药物载体，属于靶向给药系统的一种新剂型。脂质体对机体毒副作用小，其脂质双分子层与生物膜有较大的相似性与组织相溶性，易于被组织吸收。二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)是制备脂质体的重要辅料之一，脂质体研究方面有着广泛的应用，因此亟需一种能够快速准确检测二硬脂酰磷脂酰胆碱(DSPC)的方法，为DSPC的进一步研究、在医疗、化工、食品、药品、保健品等领域的应用提供技术支持。

现有技术中，检测磷脂的方法较多，主要检测方法有化学法、酶法、色谱法、核磁共振波谱法等方法。化学成本法相对较低，但是这种方法准确度不高，容易受到干扰；薄层色谱法精密度不高；专利文献CN 106404683A公开了一种酶法检测磷脂的技术，但是存在着结果精密度不高，操作繁琐、对实验操作人员要求高等缺点。现有技术公开了(arcia C,LutzNW,Confort-Gouny S,et al.Phospholipid fingerprints ofmilk from differentmammalians determinedby 31PNMR:towards specific interest in human health[J].Food Chemistry,2012,135(3):1777-1783.)用核磁共振分析牛奶中卵磷脂中各组分的含量。然而，核磁共振波谱法对仪器和实验条件要求均高，不适宜大面积推广。专利文献CN101387587公开了一种比色法检测卵磷脂含量的方法，但是其前处理繁琐，效率较低。专利文献CN110007032A公开了一种磷脂检测方法及应用，采用高效液相色谱蒸发光检测法检测磷脂，但是该方法其特异性不强，不能很好的将二硬脂酰磷脂酰胆碱于杂质分离，从而不能很好的满足检测二硬脂酰磷脂酰胆碱纯度的检测要求。

因此，亟需建立一种兼顾灵敏度高、特异性强、方法稳定和分析效率的二硬脂酰磷脂酰胆碱纯度的检测方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种兼顾灵敏度高，特异性强，方法稳定，分析效率高的二硬脂酰磷脂酰胆碱纯度的检测方法，包括如下技术方案：

本发明溶解二硬脂酰磷脂酰胆碱，采用高效液相色谱法进行检测；

进一步的，所述高效液相色谱法采用以丁基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱；

进一步的，所述高效液相色谱法的流动相的有机相为甲醇-乙腈，所述水相为三氟乙酸水溶液，所述为三氟乙酸与水的体积之比为(0.1～0.3)：100；比如，所述三氟乙酸与水的体积之比可以为0.1：100、0.125：100、0.15：100、0.175：100、0.2：100、0.225：100、0.25：100、0.275：100和0.3：100；优选的，所述三氟乙酸与水的体积之比为0.1：100。

进一步的，所述有机相中甲醇与乙腈的体积之比为3～5：1；比如，所述有机相中甲醇与乙腈的体积之比可以为3：1、3.5：1、4：1、4.5：1和5：1优选的，所述有机相中甲醇与乙腈的体积之比为4：1。