[发明专利]与紫苏耐盐相关蛋白PfWRKY33及其编码基因与应用

说明书

本发明公布了与紫苏耐盐相关蛋白PfWRKY33及其编码基因与应用。本发明提供一种蛋白，是如下(a)或(b)：(a)有序列表中序列2所示的氨基酸序列提供的蛋白质；(b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐盐有关的由序列2衍生的蛋白质。本发明的实验证明，本发明提供的PfWRKY33蛋白及其编码基因，将该基因导入丹参中，得到转基因丹参，研究发现转PfWRKY33基因的丹参耐盐性提高，说明该蛋白及其编码基因在提高植物耐盐性方面具有重要的应用价值。本发明将在植物领域中具有广阔的应用空间和市场前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中与紫苏耐盐性相关蛋白PfWRKY33及其编码基因与应用。

背景技术

随着环境气候的变化，土地的不合理利用，人类对环境的破坏等因素，全球土壤盐渍化日益严重，盐胁迫已成为抑制植物生长发育的限制因素，是影响农业可持续发展的一个重要因子。当植物处于盐胁迫环境时，植物根系会吸收大量的Na⁺，在植物体内积累过量造成离子胁迫，从而降低植物的光合效率，损害植物的新陈代谢，抑制植物的生长发育。而植物在长期的生长进化过程中形成了一套自我保护机制，通过改变植物体内的生理生化环境，形成一种抗逆机制。盐胁迫环境下，植物首先通过渗透调节途径降低细胞水势，使细胞内水分向有利于细胞生长方向运输，确保植物生长。WRKY转录调控因子在植物逆境信号传递中起着重要的调控作用，能够参与调控抗逆相关基因的表达，从而提高植物的抗逆性。WRKY转录调控因子在植物组织中表达具有特异性，并且受低温、高温、干旱和病原菌等非生物胁迫诱导表达。已有研究结果表明干旱条件下水稻OsWRKY80基因在叶中的表达量显著增加；拟南芥中过量表达AtWRKY25或者AtWRKY33基因能够显著提高拟南芥的耐盐性。

发明内容

本发明的一个目的是提供与紫苏耐盐相关蛋白PfWRKY33及其编码基因与应用。

本发明提供的与紫苏耐盐相关的蛋白，名称为PfWRKY33，来源于紫苏(Perillafrutescens L.)，如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐盐性有关的由序列2衍生的蛋白质。

所述序列2由605个氨基酸残基组成。

所述编码上述蛋白的DNA分子也属于本发明的保护范围。

所述DNA分子是如下(1)-(3)中任一种的DNA分子：

(1)编码序列为序列表中序列1所示的DNA分子；

(2)在严格条件下与(1)限定的DNA序列杂交且编码植物耐盐性相关蛋白的DNA分子；

(3)与(1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码植物耐盐性相关蛋白的DNA分子。

所述序列1由1818碱基组成，其开放阅读框(ORF)为自5′末端起第1位-第1818位碱基，编码氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白。

上述严格条件可为用6×SSC，0.5％SDS的溶液，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。

含有所述与紫苏耐盐性相关蛋白的编码基因的表达盒、重组表达载体、转基因细胞系或重组菌也属于本发明的保护范围。

所述重组表达载体是在载体pCambia1300-GFP的多克隆位点间插入所述编码基因得到的重组表达载体；