[发明专利]一种枯草芽孢杆菌及其生产农用γ-聚谷氨酸的方法有效
| 申请号: | 202210314322.8 | 申请日: | 2022-03-28 |
| 公开(公告)号: | CN115058352B | 公开(公告)日: | 2023-08-11 |
| 发明(设计)人: | 李维;葛方兰;常富城;任尧 | 申请(专利权)人: | 四川师范大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P13/02;C12R1/125 |
| 代理公司: | 广州华智创益知识产权代理有限公司 44568 | 代理人: | 李雪静 |
| 地址: | 610066 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 枯草 芽孢 杆菌 及其 生产 农用 谷氨酸 方法 | ||
1.一种枯草芽孢杆菌,其特征在于,所述的芽孢杆菌保藏名称为枯草芽孢杆菌(BacillusSubtilis)SCP0101-1,于2022年01月19日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏编号为CGMCCNo.24347。
2.一种使用权利要求1所述的枯草芽孢杆菌SCP0101-1发酵生产γ-聚谷氨酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:玉米芯粉预处理
微粉碎后玉米芯与NaOH的料液比1∶20g/mL,NaOH浓度1%,置于高压反应釜中,70℃处理2-3h,以去除木质素;纱布过滤,用自来水冲洗滤渣,烘干备用;
步骤二:酶解
在pH5.5的磷酸缓冲溶液中,加入适量的预处理后的玉米芯,加入一定量的纤维素酶,50℃,150rpm条件下,酶解35-45小时,制备获得含有木糖和葡萄糖酶解液;
步骤三:种子培养
种子培养:将经固体平板活化的枯草芽孢杆菌SCP0101-1菌种接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,摇床温度30-37℃,转速150-220rpm振荡培养12-18h至对数生长期中期;
步骤四:发酵
将种子液接入含有玉米芯酶解液、味精渣、酵母粉、硫酸镁、氯化钙的培养液中,接种量2-8%v/v,摇瓶装液量100-300mL/1000mL,摇床温度30-37℃,转速180-220rpm下培养48-72h;或者接入含有玉米芯酶解液、味精渣、酵母粉、硫酸镁、氯化钙的培养液和水的无菌发酵罐中,接种量5-10%v/v,通气量0.4-2.0vvm,30-37℃下培养48-72h;在发酵过程中,使用补料发酵方法进行发酵;
步骤五:农用γ-聚谷氨酸的提取:
发酵液用纱布进行过滤,滤液用离心机离心,得到上清液;
步骤六:包装:
加入山梨酸、苯甲酸、或者丙酸,作为防腐剂;分装产品。
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