[发明专利]一种枯草芽孢杆菌及其生产农用γ-聚谷氨酸的方法有效

专利信息
申请号: 202210314322.8 申请日: 2022-03-28
公开(公告)号: CN115058352B 公开(公告)日: 2023-08-11
发明(设计)人: 李维;葛方兰;常富城;任尧 申请(专利权)人: 四川师范大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P13/02;C12R1/125
代理公司: 广州华智创益知识产权代理有限公司 44568 代理人: 李雪静
地址: 610066 *** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 一种 枯草 芽孢 杆菌 及其 生产 农用 谷氨酸 方法
【权利要求书】:

1.一种枯草芽孢杆菌,其特征在于,所述的芽孢杆菌保藏名称为枯草芽孢杆菌(BacillusSubtilis)SCP0101-1,于2022年01月19日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏编号为CGMCCNo.24347。

2.一种使用权利要求1所述的枯草芽孢杆菌SCP0101-1发酵生产γ-聚谷氨酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤一:玉米芯粉预处理

微粉碎后玉米芯与NaOH的料液比1∶20g/mL,NaOH浓度1%,置于高压反应釜中,70℃处理2-3h,以去除木质素;纱布过滤,用自来水冲洗滤渣,烘干备用;

步骤二:酶解

在pH5.5的磷酸缓冲溶液中,加入适量的预处理后的玉米芯,加入一定量的纤维素酶,50℃,150rpm条件下,酶解35-45小时,制备获得含有木糖和葡萄糖酶解液;

步骤三:种子培养

种子培养:将经固体平板活化的枯草芽孢杆菌SCP0101-1菌种接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基中,摇床温度30-37℃,转速150-220rpm振荡培养12-18h至对数生长期中期;

步骤四:发酵

将种子液接入含有玉米芯酶解液、味精渣、酵母粉、硫酸镁、氯化钙的培养液中,接种量2-8%v/v,摇瓶装液量100-300mL/1000mL,摇床温度30-37℃,转速180-220rpm下培养48-72h;或者接入含有玉米芯酶解液、味精渣、酵母粉、硫酸镁、氯化钙的培养液和水的无菌发酵罐中,接种量5-10%v/v,通气量0.4-2.0vvm,30-37℃下培养48-72h;在发酵过程中,使用补料发酵方法进行发酵;

步骤五:农用γ-聚谷氨酸的提取:

发酵液用纱布进行过滤,滤液用离心机离心,得到上清液;

步骤六:包装:

加入山梨酸、苯甲酸、或者丙酸,作为防腐剂;分装产品。

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