[发明专利]一株桔绿木霉及其在降解鱼蛋白中的应用

说明书

本发明公开了一株桔绿木霉及其在降解鱼蛋白中的应用。本发明自马尾松树皮中筛选到对鱼蛋白具有高效降解作用的桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)0‑1，该菌株已于2021年8月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.23215。该菌株不仅能够高效降解鱼蛋白，同时对棉花黄萎病菌和芋头枯萎病菌也具有较好的抑制作用，可开发成以该菌株为功能菌株的新型鱼蛋白功能肥。

技术领域

本发明涉及一株桔绿木霉及其在降解鱼蛋白中的应用，属于微生物技术领域。

背景技术

随着现代农业与绿色农业的急速发展，传统化学肥料已无法满足农业生产要求，农产品生产效率低、农产品安全问题越来越凸显，因此，急需多功能、新型肥料来代替传统化学肥料，促进现代绿色农业向前发展。近年来，新型肥料取得飞速的发展。其中，鱼蛋白类肥料就是当下最受欢迎的一款新型肥料。鱼蛋白降解后产生的多种氨基酸和小肽，对于提高作物品质有明显的促进作用，同时能够螯合中微量元素，有利于养分的吸收利用，进而利于作物的生长和果实品质的提高。

目前，鱼蛋白降解方法主要有酸解、碱解和酶解三种方法。酸解与碱解方法虽然简单价廉，但由于反应条件剧烈，生产过程中氨基酸受损严重，且难以按规定的水解程度控制水解过程，故较少采用；酶解法在较温和的条件下进行的，能在一定条件下定位水解分裂蛋白质产生特定的肽，且易于控制水解进程，能够较好的满足肽生产的需要，但生物酶价格昂贵，制取工艺复杂，推广性不足。因此，当下急需降解效率高、生产工艺简单且价格适中的降解工艺。

在这一背景下，微生物降解法逐渐成为研究热点。但目前对降解鱼蛋白报道主要中在生物酶类物质与酸解法相互结合上，对高效降解鱼蛋白的微生物菌株鲜有报道。CN202111306622.3公开了一种甲鱼生物活性肽的制备方法，采用肉桂色曲霉和乳酸乳球菌乳酸亚种菌株的组合对甲鱼蛋白进行发酵处理，同时添加了适合于肉桂色曲霉和乳酸乳球菌乳酸亚种菌株发酵的发酵辅料，肉桂色曲霉和乳酸乳球菌乳酸亚种菌株可产生多种不同的蛋白酶，从而使甲鱼蛋白分解成多种不同的小分子肽链，该方法虽然采用菌株降解甲鱼蛋白，但是其制备活性多肽为主的食品，不适合在肥料中使用。

发明内容

鉴于此，本发明筛选到一株桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)菌株0-1，该菌株不仅能够高效降解鱼蛋白，同时对棉花黄萎病菌和芋头枯萎病菌也具有较好的抑制作用，可开发成以该菌株为功能菌株的新型鱼蛋白功能肥，为深海鱼资源开发制备功能性鱼蛋白肥料提供了新的途径。

本发明自马尾松树皮中筛选到对鱼蛋白具有高效降解作用的桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)0-1，该菌株已于2021年8月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.23215。将该菌株接种在PDA平板上，28℃恒温进行培养，分别在2d、4d观察菌落特征。结果表明，该菌株在PDA平板上菌丝平均生长速度为 18.7mm/d；前期，菌落呈白色，菌丝疏松，柳絮状，在接种处即出现黄绿色分生孢子；后期，菌落形成同心环，在同心环处产生稠密的暗绿色分生孢子，平板背面呈褐色。

本发明还提供了一种桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)0-1微生物菌剂，其特征是，采用PDB培养基对桔绿木霉0-1进行发酵(28±2℃下培养60～72h)，将发酵液过滤除去菌丝体，即得到桔绿木霉0-1的孢子悬液；孢子悬液即为该菌株微生物菌剂。

本发明还公开了上述桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)0-1及其微生物菌剂在降解鱼蛋白方面的应用。

本发明还公开了上述桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)0-1及其微生物菌剂在抑制棉花黄萎病菌方面的应用。

本发明还公开了上述桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)0-1及其微生物菌剂在抑制芋头枯萎病菌方面的应用。