[发明专利]一种诊断T-SPOT阴性结核病的标志物及其应用

说明书

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种诊断结核感染的标志物及其应用。一种诊断结核感染的标志物，所述的分子标志物为诊断T‑SPOT阴性结核病的分子标志物；该标志物为IFN‑γ和IL‑4的组合物。IFN‑γ和IL‑4的组合物作为标志物在制备诊断或监测结核病的试剂盒中的应用。本发明的优点：(1)敏感性和特异性高。(2)诊断效能高、操作简便。(3)可以提高T‑SPOT阴性结核病诊断效率。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，一种诊断T-SPOT阴性结核病的标志物及其应用。

背景技术

结核病是由结核分枝杆菌引起的一种可累及全身多个系统和器官的慢性传染性疾病，其中肺结核是临床最常见、最多发的一种结核病。该种疾病作为全球关注的公共卫生问题，具有传染性强、治疗难度大、复发率高，易发展为耐多药肺结核，增加疾病的治疗难度。可见，对结核病的早诊断及早治疗是控制其传播的关键。

目前，临床上诊断肺结核的方法仍是影像学及细菌学，细菌学培养周期长，不利于临床结核病的诊断和治疗，涂片法具有简便、快速的特点，但检测敏感性低，影响诊断结果的正确性，依靠影像学检查和临床表现的诊断，特异性低。

γ-干扰素体外释放试验(interferon-gamma release assays，IGRAs)是一种新型以T细胞免疫为基础的用于结核杆菌体外免疫检测方法。检测原理是人体感染结核分枝杆菌后，产生记忆性T淋巴细胞，当特异性结核抗原再次入侵时，记忆细胞就会迅速增殖活化形成大量的效应T淋巴细胞，释放γ-干扰素(IFN-γ)及其它多种细胞因子，进一步通过酶联免疫吸附检测(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)或者酶联免疫斑点检测(enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT)的方法进行检测来判断体内是否存在结核分枝杆菌感染。T-SPOT是结核菌感染T淋巴细胞斑点实验(T-SPOT.TB)，该方法利用TB特异性抗原刺激外周血单核细胞(PBMC),通过检测抗原特异性T淋巴细胞分泌的IFN-γ而判断TB感染状态，是临床常用的免疫学诊断方法。

近年来，IGRAs在结核病的诊断中得到了广泛的应用，其具有良好的敏感度及特异性，能提高疾病的诊断率。

现阶段，基于外周血细胞的免疫反应的结核病诊断中以IFN-γ为主，以此为诊断标志物虽然具有较好的敏感度，但是也具有一定的局限性，临床研究表面：由于结核病患者免疫应答的差异，大概有10-15％的结核病患者T-SPOT检测是阴性的，因此，寻找IFN-γ以外的诊断标志物，补充IFN-γ诊断的不足之处，或与IFN-γ联合应用，来提高诊断的敏感性是临床所期望的。

中国发明专利申请CN106568971A公开了用于诊断结核病的IP10和Eotaxin联合细胞因子及其试剂盒。该申请通过初诊结核病患者血浆中细胞因子的检测，提高肺结核的诊断能力。但是，血浆中相应因子出现的晚且特异性低，存在一定的局限性。性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种诊断效能高、操作简便，敏感度高、特异性好、可以提高T-SPOT阴性结核病诊断效率的标志物。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种诊断T-SPOT阴性结核病的分子标志物，所述分子标志物为IFN-γ和IL-4的组合物。

进一步的，所述分子标志物IFN-γ和IL-4是通过高通量液相芯片技术筛选得到的分子标志物。

本发明还提供分子标志物的应用。

IFN-γ和IL-4联合作为标志物在制备诊断或监测结核病的试剂盒中的应用。进一步，所述结核病为T-SPOT检测为阴性的结核病。

本发明还提供一种含有分子标志物的试剂盒。