[发明专利]一种检测克百威的试纸条及方法

说明书

本发明公开了一种检测克百威的试纸条及方法。该试纸条包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板，所述反应膜上具有包被有克百威半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线，所述结合物释放垫上喷涂有克百威单克隆抗体‑胶体金标记物。本发明还提供一种应用上述试纸条检测植物源性食品中克百威的方法。本发明提供的试纸条具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低、适于大批量样本筛查等优点，能够满足我国食品监管部门开展现场监控和检测工作。

技术领域

本发明涉及一种检测克百威的试纸条及方法，具体涉及一种用于检测克百威的胶体金试纸条，其特别适用于蔬菜、水果等植物源性食品中克百威的检测。

背景技术

克百威，又名呋喃丹、虫螨威，属氨基甲酸酯类农药，为内吸性广谱型杀虫、杀螨剂，具有触杀和胃毒的作用。其作用机制与有机磷类似，为抑制乙酰胆碱酯酶的活性，依靠抑制剂和酶活性区间的亲和力形成抑制剂络合物，从而破坏正常的神经冲动传导，引起异常兴奋、痉挛、麻痹及死亡等症状，可用于防治水稻、花生、甘蔗、棉花等作物的大部分害虫，主要为内吸杀虫作用。

克百威与其他氨基甲酸酯类杀虫剂所不同的是，其与乙酰胆碱酯酶的结合是不可逆的，因此克百威毒性高，一旦暴露与环境中，残留时间较长，对鸟类、蜜蜂和水生动物如鱼类具有高度毒性。美国环境保护署(EPA)将其列为剧毒类农药，2006年，EPA认为克百威的使用存在较高的生态与职业风险，且由于克百威在马铃薯、甜玉米和葫芦上的广泛使用而大大提高了饮食风险；2008年，又重新对其进行了风险评估；2009年12月31日起全部取消了克百威的残留值，即克百威为禁用农药，我国国家标准GB 2763《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》也规定了蔬菜、水果中克百威的最大残留限量为0.02mg/kg。

目前，检测克百威主要采用高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、气相色谱-质谱联用法等分析方法，这些方法均须在实验室条件下操作，样品前处理繁琐费时，还需配备昂贵的仪器设备，检测成本较高、耗时长、操作复杂，在实际应用过程中有很大的限制性，难以满足大量样品和现场样品快速检测的需要。因此，开发一种简单快速、适用于食品中克百威检测的胶体金试纸条，可满足大量样品现场筛选和监控，能够更好地满足我国食品监管部门等开展检测工作。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够检测植物源性食品中克百威的胶体金试纸条，并且提供一种高效、准确、简便、适于现场监控和大量样本筛查的检测方法。

本发明所提供的检测克百威的试纸条，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；所述反应膜上具有包被有克百威半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线；所述结合物释放垫上喷涂有克百威单克隆抗体-胶体金标记物。

所述克百威单克隆抗体是以克百威半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得。

所述克百威半抗原-载体蛋白偶联物由克百威半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清白蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白或人血清白蛋白，所述克百威半抗原是以2-n-丁氨基丙酸为起始原料，经过硫化、氯化后再与3-羟基克百威反应得到的，其分子结构式为：

所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫依次粘贴在底板上，所述结合物释放垫1/3～1/2被覆盖于样品吸收垫下。

所述底板为PVC底板或其他硬质不吸水的材料；所述样品吸收垫为聚酯纤维或玻璃纤维材质；所述结合物释放垫为聚酯纤维素膜或玻璃纤维素膜；所述吸水垫为吸水滤纸；所述反应膜为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述试纸条的方法，其包括步骤：

1)制备喷涂有克百威单克隆抗体-胶体金标记物的结合物释放垫；

2)制备具有包被有克百威半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线的反应膜；