[发明专利]一种检测血清中白细胞介素6的方法

说明书

本发明涉及医学检测技术领域，特别是涉及一种检测血清中白细胞介素6的方法，具体包括如下步骤：S1、预处理：室温下血液自然凝固，离心后收集上清；S2、加样：在标准品孔内分别添加不同浓度的标准品，在样本孔内添加上清样品，并向标准品孔和样品孔内分别加入酶标试剂，温育60min；S3、样品处理：添加洗涤液，重复洗涤5次，拍干；S4、样品检测：加入显色剂A，再分别加入显色剂B，避光显色，依次测量各孔的吸光度；S5、计算浓度。本发明操作简单，检测速度快，可定量或大批量检测，检测结果的准确性高，重复性良好，稳定性和检测效率高。

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，特别是涉及一种检测血清中白细胞介素6的方法。

背景技术

白细胞介素是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。由于最初是由白细胞产生又在白细胞间发挥作用，所以由此得名，现仍一直沿用。最初是指由白细胞产生又在白细胞间起调节作用的细胞因子。现在是指一类分子结构和生物学功能已基本明确，具有重要调节作用而统一命名的细胞因子，它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调，相互作用，共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。

白细胞介素6具备以下功能：刺激活化B细胞增殖，分泌抗体；刺激T细胞增殖及CTL活化；刺激肝细胞合成急性期蛋白，参与炎症反应；促进血细胞发育；促进人主动脉瓣间质细胞成骨样分化及成钙能力。

目前市面上ELISA检测试剂盒的检测原理基本一致，通过形成抗体-抗原-酶标抗体复合物来检测白细胞介素6的含量。但这些试剂盒检测时稳定性差，使用不便，检测效率低，样本检测的准确度不高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测血清中白细胞介素6的方法，以解决上述背景技术中提到的问题。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种检测血清中白细胞介素6的方法，包括以下步骤：

S1、预处理：室温下血液自然凝固10～20分钟，离心后收集上清作为样品；

S2、加样：在酶标板上设置空白孔、标准品孔和样品孔，在标准品孔内分别添加50μL不同浓度的标准品，在样本孔内添加50μL的上清样品，并向标准品孔和样品孔内分别加入100μL酶标试剂，用封板膜密封酶标板，并在37℃下将酶标板温育60min；

S3、样品处理：温育结束后，揭去酶标板上的封板膜，弃去酶标板上的液体，甩干，并向空白孔、标准品孔和样品孔内分别添加250μL洗涤液，静置30s后弃去，重复洗涤5次，拍干；

S4、样品检测：向空白孔、标准品孔和样品孔内分别加入50μL显色剂A，再分别加入50μL显色剂B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟，再向各孔内分别加入50μL终止液终止反应，450nm波长下依次测量各孔的吸光度；

S5、计算浓度：以标准物的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘出标准曲线，并计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的吸光度值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

优选的，步骤S1中，离心时转速设置为2000～3000r/min，离心时间设置为20min。

优选的，步骤S1中，保存过程中样品出现沉淀时，再次离心，收集上清作为样品。

优选的，步骤S2中，加样时加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

优选的，步骤S3中，所述洗涤液选自用蒸馏水稀释20倍后的浓缩洗涤液。

优选的，步骤S4中，终止反应后的15min内测量各孔的吸光度。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：