[发明专利]企鹅珍珠贝Mitf基因的启动子及其应用有效
| 申请号： | 202210279043.2 | 申请日： | 2022-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN114517199B | 公开（公告）日： | 2023-07-28 |
| 发明（设计）人： | 于非非;曲炳良;鲁义善;余祥勇;钟智明;陈家宇;林金姬 | 申请（专利权）人： | 广东海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/53;C12N5/10 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 赵崇杨 |
| 地址： | 524088 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 企鹅 珍珠贝 mitf 基因 启动子 及其 应用 | ||
1.一种企鹅珍珠贝Mitf基因的启动子，其特征在于，所述启动子的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。
2.一种重组载体，其特征在于，所述载体中含有权利要求1所述启动子的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述重组载体，其特征在于，所述载体为权利要求1所述启动子驱动的荧光素酶报告基因重组载体。
4.根据权利要求3所述重组载体，其特征在于，所用载体为pGL3-Basic荧光素报告基因载体。
5.一种重组细胞，其特征在于，所述细胞中含有权利要求2～4任一所述重组载体。
6.根据权利要求5所述重组细胞，其特征在于，所用细胞为293T细胞。
7.权利要求1所述启动子，权利要求2～4任一所述所述重组载体，权利要求5或6所述重组细胞在筛选/鉴定企鹅珍珠贝Mitf基因的转录因子中的应用。
8.一种筛选/鉴定企鹅珍珠贝Mitf基因的转录因子的方法，其特征在于，包含以下步骤：
S1.构建含待鉴定目的基因的重组载体；
S2.将步骤S1所得重组载体与权利要求3或4所述荧光素酶报告基因重组载体共同转染细胞，收集细胞进行双荧光素酶报告分析；
S3.结果判定，若过表达目的基因的细胞的荧光素酶活性高于对照，则表明所鉴定的目的基因为企鹅珍珠贝Mitf基因的转录因子。
9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，步骤S1所用表达载体为pcDNA3.1。
10.根据权利要求8所述方法，其特征在于，步骤S3结果判定中以pcDNA3.1空载体和权利要求3或4所述重组载体共转染的细胞作为阴性对照。
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