[发明专利]无创方式判断子宫内膜容受性的方法、模型和标志物

说明书

无创方式判断子宫内膜容受性的方法、模型和标志物。本发明提供了以无创取样方式所获取的样本预测子宫内膜容受性的方法，以及使用所述样本建立预测模型的方法和所建立的预测模型，以及所述样本中与子宫内膜容受性相关联的标志物和相应的试剂盒。

发明领域

本发明涉及生物领域和临床辅助生殖领域，更具体地涉及一种无创方式判断子宫内膜容受性的方法，和该方法中所用的标志物、预测模型和相应的试剂盒、系统。

背景技术

人类生殖过程中，受精卵在母体子宫内定位、黏附、着床，最终发育成一个成熟的胎儿，着床过程对成功妊娠具有重要影响，成功的临床妊娠除需要优质的胚胎之外还需要良好的子宫内膜容受性(endometrial receptivity，ER)、子宫内膜与胚胎的同步发育。子宫内膜容受性是一种生理现象，是指子宫内膜对胚胎的接受能力，只有在短暂的特定时期内子宫内膜才允许胚胎着床，这一时期称为“着床窗口期”，就成年女性而言，相当于月经周期第20-24日或排卵后6-8日。

子宫内膜容受性的具体机制目前尚不完全清楚，但可以明确的是，子宫内膜处在非容受期是导致体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中胚胎着床失败的重要原因之一。胚胎移植的成功率是非常重要的，直接关系到此前付出的所有代价和成本能够成功还是功亏一篑。然而，传统的利用月经周期窗口期的方式并不总是可行，甚至对于相当一部分受试者，例如反复移植失败的女性，或者罹患其他继发性不孕症的女性，着床窗口期的时间节点非常不准确，如果仍然按月经周期或者排卵日推算着床窗口期，会有很大移植失败的风险。

临床上已经有多种判断内膜容受性的方式，例如经阴道超声、血清雌孕激素水平、子宫内膜活检等方法来判断子宫内膜种植窗的时间，但均存在一定的误差。随着分子生物学的进步、尤其是人类基因组计划的完成，将基因作为分子标志物来辅助判断各种生理状态和病理状态的临床应用越来越成熟。但是，在子宫内膜容受性的预测上，已有的方法均存在一显著的缺点，即它们所用的样本均来自对内膜组织进行活检取样。这种有创的方式给母体带来了不必要的损伤，也有潜在的不稳定因素，因而降低了受试者的依从性，并且其损伤造成活检周期无法进行胚胎移植，延长了受试者的达孕时间与ART周期。此外，额外操作本身也是一种耗费资源、增加受试者痛苦的方式。

研究人员都一直在追求更简便的、创伤更小的检查方式，对于内膜容受性预测也不例外。临床上迫切需要一种高效的、无创的内膜容受性诊断方法。

发明简述

本发明提供了一种无创取样的判断子宫内膜容受性的方法。

在第一个方面，本发明提供了一种利用无创方式获取待分析活体样本的方法。在一个具体的实施方式中，所述无创方式是胚胎预移植时移植管壁粘附痕量组织。在另一个具体的实施方式中，所述无创方式是胚胎移植时移植管壁粘附痕量组织。

在一个实施方案中，通过无创方式所获取的样本中，细胞数少于1000个。在一个更具体的实施方案中，通过无创方式所获取的样本中，细胞数少于900个、800个、700个、600个、500个、400个、300个或200个。在一个优选的实施方案中，通过无创方式所获取的样本中，细胞数介于400个和300个之间。

在一个具体的实施方案中，本发明的方法进一步包括通过截取加冲洗的方法，将管壁的细胞、组织转移至样本采集管中。在一个具体的实施方案中，在一个优选的实施方案中，样本采集管内预先加入了组织样本保存液，