[发明专利]一种响应面法优化凤丹牡丹种皮多糖提取方法

说明书

本发明公开了一种响应面法优化凤丹牡丹种皮多糖提取方法，将‘凤丹’牡丹种皮置于65℃烘箱中至恒重，然后用旋风磨制粉，将粉末经过100目筛子后，贮于棕色磨砂广口瓶，密封放于4℃冰箱备用；准确称取‘凤丹’牡丹种皮样品干粉5g置于烧杯内，按一定液料比加入蒸馏水，搅拌均匀后加入干粉重量1％的纤维素酶，摇匀后在设定的温度下水浴提取或在烘箱中提取相应时间，本申请针对现有需要进行设计，以水作为提取剂，在1％纤维素酶的催化作用下，把提取时间、液料比、提取温度作为研究因素，考察不同工艺参数对‘凤丹’牡丹种皮多糖得率的影响，并采用响应面法优化‘凤丹’牡丹种皮多糖提取工艺。

技术领域

本发明涉及生物科技技术领域，具体是一种响应面法优化凤丹牡丹种皮多糖提取方法。

背景技术

‘凤丹’牡丹属于落叶灌木，不仅可供欣赏，同时又有药用价值和油用价值。丹皮有抗过敏、消炎、免疫、解热等药用价值。其种子具有很好的油用价值。将种子壳仁分离后，用籽仁压榨的油金黄色透明，含有许多对人体有益的脂肪酸成分。但是大量分离出来的种皮却没有得到充分的利用。因此，在了解到植物多糖有提高人体免疫力、降血糖、抗氧化等诸多益处的基础上，本试验以‘凤丹’种皮为研究对象，以水作为提取剂，在酶辅助条件下提取种皮中的多糖。由于响应面分析法能同时研究几种因素间交互作用，得到的回归方程精确度高，且具有试验周期短等优点，因此采用响应面分析法优化‘凤丹’牡丹种皮多糖提取工艺。

发明内容

本发明的目的在于提供一种响应面法优化凤丹牡丹种皮多糖提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种响应面法优化凤丹牡丹种皮多糖提取方法，包括以下步骤：

步骤一：材料预处理，将‘凤丹’牡丹种皮置于65℃烘箱中至恒重，然后用旋风磨制粉，将粉末经过100目筛子后，贮于棕色磨砂广口瓶，密封放于4℃冰箱备用；

步骤二：准确称取‘凤丹’牡丹种皮样品干粉5g置于烧杯内，按一定液料比加入蒸馏水，搅拌均匀后加入干粉重量1％的纤维素酶，摇匀后在设定的温度下水浴提取或在烘箱中提取相应时间；

步骤三：提取结束后在烧杯内加入相同温度的蒸馏水至原体积，4000r/min离心10min后，取上清液备用，以空白对照作为参比液，于625nm波长处测定吸光度，之后依照标准曲线方程计算提取液中多糖含量，‘凤丹’牡丹种皮多糖得率计算参照如下公式：

式中：C——样品中多糖浓度，mg/mL；V——提取上清液体积，ml；N——稀释倍数；M——果皮质量g。

作为本发明进一步的方案：所述步骤二中的提取时间2.19h，液料比24.5∶1，提取温度90.8℃。

作为本发明进一步的方案：以A液料比、B提取温度、C提取时间为自变量，建立20个响应面试验方案，以检测多糖提取率；

回归方程拟合及方差分析；

多糖得率回归方程拟合及方差分析：回归分析结果见表3，对各因素回归拟合后，以A、B、C为自变量对得率Y进行数据拟合建立如下多元二次回归方程：

Y＝5.38+0.56A+0.32B+0.58C-0.032AB-0.010AC-0.45BC-0.61A²-0.89B²-0.73C²。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本申请针对现有需要进行设计，以水作为提取剂，在1％纤维素酶的催化作用下，把提取时间、液料比、提取温度作为研究因素，考察不同工艺参数对‘凤丹’牡丹种皮多糖得率的影响，并采用响应面法优化‘凤丹’牡丹种皮多糖提取工艺。

附图说明

图1为本发明的结构示意图。