[发明专利]热带爪蛙视神经损伤模型构建方法、模型及应用方法

说明书

本发明涉及热带爪蛙视神经损伤模型构建方法、模型及应用方法，其中建模实现方法如下：在显微镜观测下，采用激光对麻醉后幼年时期热带爪蛙的球后视神经造成损伤，获得热带爪蛙视神经损伤模型；国内外首创的采用激光对麻醉后幼年时期热带爪蛙的球后视神经造成损伤获得热带爪蛙视神经损伤模型，具有如下优势：热带爪蛙幼时身体透明，激光可直视下、准确聚焦、定量损伤，这种视神经损伤造模方法准确、可控、成功率高、死亡率低；热带爪蛙的基因组与人类基因组高度同源，其眼球、视网膜和视神经、视路组织结构和视觉信息传导通路与人类高度类似；热带爪蛙视神经可再生，有助于损伤后再生修复机制研究，为视神经保护研究开辟新的途径和方法。

技术领域

本发明涉及视神经模型技术领域，更具体地说，涉及一种热带爪蛙视神经损伤模型构建方法、热带爪蛙视神经损伤模型及应用方法。

背景技术

视神经保护一直是临床和基础研究的热点和难点，视神经损伤动物模型的建立，对于视神经保护研究的开展非常重要；目前视神经损伤动物模型多是采用啮齿类动物(如大鼠、小鼠)，或非哺乳性脊椎动物(如斑马鱼)，采用直接离断、挤压、牵拉，或液压冲击等方式造成直接或间接视神经损伤；

现有的方式中存在以下缺陷：

1、视神经位于眼球后部、眼眶深部，周围血管、肌肉组织丰富，通过钳夹、离断、牵拉等方式直接损伤视神经，会造成手术入路周围组织的损伤、如球后出血等。

2、直视下钳夹视神经需要过度牵拉眼球，并且钳夹部位难以精确、一致，视神经损伤无法定量，难以做到造模动物视神经损伤的一致性。

3、动物全麻下进行显微手术，操作者需要熟练掌握相关技术，动物有一定死亡率和致盲率。

4、通过液压冲击、颅脑冲击伤等间接视神经损伤方法，不仅造成视神经以外组织的损伤，而且也难以保证造模动物视神经损伤的一致性。

5、目前常用的啮齿类动物(如大鼠、小鼠)，无法进行视神经损伤后自我再生和修复研究。

6、非哺乳性脊椎动物(如斑马鱼)，无法在活体进行离水干预、构建视神经精准损伤模型。

需要一种能够克服上述缺陷的动物视神经模型以及建模的方式方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术的上述缺陷，提供一种热带爪蛙视神经损伤模型构建方法、热带爪蛙视神经损伤模型及应用方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

构造一种热带爪蛙视神经损伤模型构建方法，其实现方法如下：

在显微镜观测下，采用激光对麻醉后幼年时期热带爪蛙的球后视神经造成损伤，获得热带爪蛙视神经损伤模型。

本发明所述的热带爪蛙视神经损伤模型构建方法，其中，所述幼年时期为47-54期。

本发明所述的热带爪蛙视神经损伤模型构建方法，其中，所述热带爪蛙采用52-54期热带爪蛙。

本发明所述的热带爪蛙视神经损伤模型构建方法，其中，所述激光采用短脉冲掺钕钇铝石榴石激光。

本发明所述的热带爪蛙视神经损伤模型构建方法，其中，采用激光对麻醉后热带爪蛙的球后视神经造成损伤方法为：

通过N次对麻醉后热带爪蛙的球后视神经定量发射激光。

本发明所述的热带爪蛙视神经损伤模型构建方法，其中，每次发射激光能量范围为0.4-0.8mJ。

本发明所述的热带爪蛙视神经损伤模型构建方法，其中，每次发射激光能量为0.6mJ。

一种热带爪蛙视神经损伤模型，其中，所述热带爪蛙视神经损伤模型通过如上述的热带爪蛙视神经损伤模型构建方法构建而成。