[发明专利]一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶及其制备方法

权利要求书

1.一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备血小板膜：

将抗凝全血加入到离心管中，经第一次离心后获得富含血小板的血浆；对血浆使用稀释剂稀释后，进行第二次离心，并用PBS混合液重悬第二次离心后获得的血小板；对悬浮在PBS混合液中的血小板进行反复冻融获得血小板膜；对血小板膜进行第三次离心，丢弃上清液并分离出血小板膜；利用PBS缓冲液对血小板膜洗涤后，进行超声处理、冻干以及称重；

S2、制备仿生血小板水凝胶：

在去离子水中添加海藻酸盐、1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基-碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，配置活化的海藻酸盐溶液；在去离子水中添加S1制备得到的血小板膜，配置血小板膜溶液；将活化的海藻酸盐溶液和血小板膜溶液混合，通过活化的海藻酸盐的羧基基团与血小板膜上的胺基共价偶联，形成仿生血小板水凝胶。

2.根据权利要求1所述的一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，

步骤S1中，所述抗凝全血为新鲜的或者在-4℃环境中保存一周以内的人或动物的抗凝全血，其用量为0.02-20mL。

3.根据权利要求1所述的一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，

步骤S1中，所述第一次离心的离心力为100-500g，离心时间为5-30分钟；所述第二次离心的离心力为100-2000g，离心时间为5-50分钟；所述第三次离心的离心力为1000-10000g，离心时间为5-60分钟。

4.根据权利要求1所述的一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，

步骤S1中，所述PBS混合液和PBS缓冲液中均添加有0.2-10mM的蛋白酶抑制剂，所述PBS混合液中还添加有0.1-15mM的乙二胺四乙酸抗凝剂。

5.根据权利要求1所述的一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，

步骤S1中，在所述冻融这一步骤中，冷冻温度为-100～-20℃，解冻温度为1～45℃，冻融次数为1-10次。

6.根据权利要求1所述的一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，

步骤S1中，所述超声处理使用的超声仪频率设置为20-100kHz，功率设置为5-500W，超声时间设置为1-30分钟。

7.根据权利要求1所述的一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，

步骤S2中，所述活化的海藻酸盐溶液体积为5-10000μL，海藻酸盐的浓度为0.2-20wt％，1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基-碳二亚胺的添加量为0.5-50mg，N-羟基琥珀酰亚胺的添加量为0.3-30mg。

8.根据权利要求1所述的一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，

步骤S2中，所述血小板膜溶液的浓度为1-100mg/mL。

9.根据权利要求1所述的一种用于伤口修复的仿生血小板水凝胶的制备方法，其特征在于，

步骤S2中，活化的海藻酸盐和血小板膜的混合溶液中添加有银纳米颗粒，其浓度为1-2000μg/mL。

10.一种如权利要求1-9中任一项所述的制备方法得到的用于伤口修复的仿生血小板水凝胶。