[发明专利]lncRNA及其靶基因在羊卵巢发育中的应用

说明书

本发明涉及lncRNA及其靶基因在羊卵巢发育中的应用，具体涉及MSTRG.12709及其靶基因FSHR在制备检测卵巢发育水平试剂中的应用。卵巢是哺乳动物重要的生殖器官，它的健康发育对于动物繁殖具有重要作用，本申请通过高通量测序技术研究卵巢发育相关的基因，探索影响卵巢发育和成熟的分子机制探索lncRNA影响卵巢发育的调控机制，为畜牧生物育种提供基础。

技术领域

本发明属于细胞工程和基因工程技术领域，具体涉及lncRNA及其靶基因在羊卵巢发育中的应用。

背景技术

随着基因组学和分子生物学的发展，发现了大量长非编码RNA。许多lncRNA 在多个生物过程中发挥作用。但是对于lncRNA的作用在很大程度上是未知的，仍有许多功能待于完善和挖掘，对于lncRNA在卵巢发育方面的研究更是局限。李加宇等人通过qPCR发现lncRNA647、lncRNA147和lncRNA274在小鼠卵巢组织中特异性高表达，并检测出在小鼠不同发育阶段和发情时期下，三种lncRNA 的表达量发生变化并具有一定规律。但目前关于lncRNA在羊卵巢发育方面的研究鲜有报道。

卵巢是哺乳动物重要的生殖器官，也是配子和类固醇性激素的重要来源，它的健康发育对于动物繁殖具有重要作用。卵巢发育情况复杂，各个过程必须正常才能保证繁殖活动的顺利进行。此外，卵巢是一个动态变化的器官，发育过程包括卵母细胞和颗粒细胞的成熟，过程繁琐复杂，除了有各个激素影响外还受各种因子调节，例如成熟促进因子(MPF)、卵母细胞成熟抑制因子(OMI)、环腺苷酸(cAMP)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、Ca+、生长分化因子(GDF)等。

为了探究卵巢发育的分子机制，本申请选取中国本土湖羊品种为实验对象，采用RNA-seq技术对卵巢组织中的lncRNA进行测序分析，比较1月龄、3月龄的湖羊卵巢组织中lncRNA的差异表达情况，利用生物信息学方法筛选出各阶段差异表达的lncRNA及其调控基因，从而筛选出调控卵巢组织发育的lncRNA及其调控基因，探索lncRNA影响卵巢发育的调控机制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种与羊卵巢发育相关的lncRNA，所述lncRNA为MSTRG.12709，序列与SEQ ID NO.1具有90％以上序列同源性。

优选的，MSTRG.12709序列与SEQ ID NO.1具有95％以上序列同源性；更优选的，长链非编码RNA序列为SEQ ID NO.1。

MSTRG.12709及其靶基因用于制备检测卵巢发育水平试剂中的应用。

优选的，通过测序技术、核酸杂交技术或核酸扩增技术检测MSTRG.12709 及其靶基因的表达水平。

优选的，MSTRG.12709的靶基因为FSHR。

优选的，核酸扩增技术采用一对特异性引物扩增MSTRG.12709基因；核酸杂交包括与FSHR基因的核酸序列杂交的探针。

优选的，通过免疫方法检测FSHR基因表达产物的表达水平。

优选的，通过ELISA检测试剂盒和/或胶体金检测试剂盒检测FSHR基因达产物的表达水平。

优选的，卵巢为羊卵巢。

一种检测羊卵巢发育的试剂，试剂包含用于核酸扩增的引物对，检测MSTRG.12709基因的表达水平。

优选的，用于核酸扩增的引物对序列为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3。

优选的，试剂检测的样本为组织。

附图说明

图1为总RNA琼脂糖凝胶电泳结果；

图2为卵巢组织差异表达mRNA KEGG pathway富集分析(H1 vs H3)图；