[发明专利]一种生物大分子相连胶体金标记超敏纳米颗粒及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种生物大分子相连胶体金标记超敏纳米颗粒及其制备方法和应用，包括纳米核心、纳米胶体金颗粒和生物大分子，纳米胶体金颗粒连接并均匀分布于纳米核心的表面，生物大分子与纳米胶体金颗粒相连。将本发明用于体外诊断试剂，特别是侧流层析试剂的制备，可将侧向层析体外诊断试剂灵敏度大幅度提升，尤其使对冠状病毒抗原侧向层析检测试剂灵敏度最高提升100倍以上，有效检测浓度达到CT＝36水平，基本可以媲美核酸检测，大幅度超越全球市场上已在售的所有同类产品，在某些使用场景中，本发明完全可以替代核酸检测来使用。

技术领域

本发明属于体外诊断技术领域，具体涉及一种生物大分子相连胶体金标记超敏纳米颗粒及其制备方法和应用。

背景技术

目前已知的冠状病毒的强变异株传播力从1名感染者平均传染2-3人提升至1名感染者平均传染8-9人，传播力大大提升；病毒载量也大幅提升，导致重症和危重症比例提到，时间提前；免疫逃逸情况加剧，大量已接种两剂新冠疫苗的人员感染。

因此全球的抗疫形势对于冠状病毒感染的诊断的快速、准确的要求将越来越高。

为应对紧张的疫情，冠状病毒抗原检测试剂研发速度加快，在企业研发速度加快、市场需求持续释放的推动下，全球冠状病毒抗原检测市场规模将进一步扩张，而抗原试剂灵敏度的提升需求越来越受全球诊断试剂厂家的重视。

2021年5月全球著名的评估机构德国保罗埃利希研究所(PEI)发表的《Comparative sensitivity evaluation for 122CE-marked SARS-CoV-2antigen rapidtests》，该研究对全球已获得CE认证的122种冠状病毒抗原快速检测试剂进行灵敏度的评估，报告研究对象基本包含目前国际市场上市场占有率、品牌知名度比较好的几乎所有抗原快速检测产品，包含了胶体金和荧光技术平台，其中不乏罗氏、雅培、西门子等国际著名诊断试剂厂家。因此这份权威报告基本可以代表2021年5月当时世界上新冠抗原快速检测产品的最高水平。其中，国内厂家试剂排名前五结果如下：

国外厂家试剂排名前五结果如下：

综合来看，国内外在冠状病毒抗原快速检测试剂领域的技术水平相差不大。市场上最高水平为有效检测CT＜30样本，CT＞30整体符合率非常差。现有技术中冠状病毒的PCR试剂采用40个循环进行扩展检测，通常认为CT＝36为PCR有效检测的临界值，36个循环(CT＜36)以内特异性非常好，36-40个循环(CT 36-40)灵敏度进一步提高，但特异性会有所下降，存在一定的假阳概率。此外，冠状病毒抗原快速检测试剂对比PCR试剂灵敏度差距巨大，差距在2⁶倍(64倍)以上

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种生物大分子相连胶体金标记超敏纳米颗粒。

本发明的另一目的在于提供上述生物大分子相连胶体金标记超敏纳米颗粒的应用。

本发明的技术方案之一如下：

一种生物大分子相连胶体金标记超敏纳米颗粒，包括纳米核心、纳米胶体金颗粒和生物大分子，纳米胶体金颗粒连接并均匀分布于纳米核心的表面，生物大分子与纳米胶体金颗粒相连，纳米核心的粒径为100-500nm，纳米胶体金颗粒的粒径为15-100nm，其中，

纳米核心上具有活化的-NH₂，纳米胶体金颗粒上具有通过巯基化合物活化的-COOH，生物大分子上具有活化的-NH₂，纳米胶体金颗粒上的活化的-COOH分别与纳米核心和生物大分子上的活化的-NH₂反应形成酰胺，实现纳米胶体金颗粒与纳米核心和生物大分子的化学连接。

在本发明的一个优选实施方案中，所述纳米核心为纳米硅核心或乳胶微球核心。