[发明专利]一种用于解决青春痘的细胞因子敷料及其制备方法在审
申请号: | 202210191032.9 | 申请日: | 2022-02-28 |
公开(公告)号: | CN114533935A | 公开(公告)日: | 2022-05-27 |
发明(设计)人: | 闫茜茜;冯欣丽;吴小佳 | 申请(专利权)人: | 浙江卫未生物医药科技有限公司 |
主分类号: | A61L15/40 | 分类号: | A61L15/40;A61L15/26;A61L15/20;A61L15/32;A61L15/28;A61L15/18;A61L15/42;A61L15/44;A61L15/46;C12N5/0775;C12N5/078 |
代理公司: | 北京沁优知识产权代理有限公司 11684 | 代理人: | 胡妍 |
地址: | 310000 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 解决 青春痘 细胞因子 敷料 及其 制备 方法 | ||
1.一种用于解决青春痘的细胞因子敷料,其特征在于:按照重量份数包括以下组分:
细胞因子冻干粉1-2份、聚谷氨酸5-15份、甘油2-6份、柠檬酸0-2份、胶原蛋白10-20份、海藻酸钠0-15份、角蛋白1-2份、壳聚糖5-10份、碳酸氢钠0-2份。
2.根据权利要求1所述的一种用于解决青春痘的细胞因子敷料,其特征在于:按照重量份数包括以下组分:
细胞因子冻干粉1.2-1.8份、聚谷氨酸7-13份、甘油3-5份、柠檬酸1份、胶原蛋白12-18份、海藻酸钠3-12份、角蛋白1-2份、壳聚糖6-9份、碳酸氢钠1份。
3.根据权利要求1所述的一种用于解决青春痘的细胞因子敷料,其特征在于:所述细胞因子冻干粉内含有细胞因子,所述细胞因子为干细胞与免疫细胞共培养的外泌体,所述细胞因子的活性单位为5000U/g。
4.根据权利要求3所述的一种用于解决青春痘的细胞因子敷料,其特征在于:所述细胞因子冻干粉的制备方法为:将干细胞与免疫细胞共培养后,再单独收集获取干细胞的培养上清,进行冻干,得到细胞因子冻干粉。
5.根据权利要求4所述的一种用于解决青春痘的细胞因子敷料,其特征在于:干细胞与免疫细胞共培养,具体为:
S1:将干细胞进行传代培养;
S2:取骨髓细胞,加入红细胞裂解液进行裂解,离心,获得免疫细胞;
S3:采用培养基洗吹三次,离心,采用培养基进行吹打获得重悬细胞,转移至培养瓶中培养24-48h;
S4:将所述干细胞与所述免疫细胞分别转移至共培养装置中,进行共培养。
6.根据权利要求5所述的制备用于解决青春痘的细胞因子敷料的方法,其特征在于:所述干细胞为间充质干细胞。
7.根据权利要求5所述的一种用于解决青春痘的细胞因子敷料,其特征在于:制备细胞因子冻干粉包括如下步骤:
将空白培养基加入S4所述的共培养装置中,24h-48h后收取干细胞培养上清液;在4℃,2000g的条件下离心30min,弃去沉淀,得到培养上清液;
将所述培养上清液与外泌体提取液以体积比2:1进行混合,在4℃条件下孵育过夜,得到孵育液,将孵育液在4℃,10000g的条件下离心60min,吸取底部沉淀,获得含外泌体的浓缩液;
将浓缩液用PBS缓冲液进行溶解,得到外泌体盐溶液,将所述外泌体盐溶液进行冻干,得到细胞因子冻干粉。
8.根据权利要求7所述的一种用于解决青春痘的细胞因子敷料,其特征在于:所述冻干温度为-80℃,冻干12h。
9.制备权利要求1-8任一所述的用于解决青春痘的细胞因子敷料的方法,其特征在于:包括如下步骤:
步骤一:将角蛋白加入50-60份去离子水中,进行搅拌,搅拌均匀后加入称量好的聚谷氨酸、胶原蛋白和碳酸氢钠,搅拌均匀获得溶液A;
步骤二:将壳聚糖加入50-60份去离子水中,进行搅拌,搅拌均匀后加入称量好的甘油、柠檬酸、细胞因子冻干粉和海藻酸钠,搅拌均匀获得溶液B;
步骤三:将所述溶液A和溶液B进行混合搅拌1-2min,至于培养皿中,进行冻干即得成品。
10.根据权利要求9所述的制备用于解决青春痘的细胞因子敷料的方法,其特征在于:步骤三中,冻干温度为-80℃,冻干6-8h。
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