[发明专利]一种基于苯并噻唑衍生物半胱氨酸的荧光探针及其制备方法

说明书

本发明公开了一种基于苯并噻唑衍生物半胱氨酸的荧光探针，荧光探针的化学结构式如下所示：本发明采用上述的一种基于苯并噻唑衍生物半胱氨酸的荧光探针及其制备方法，荧光探针合成简单，对半胱氨酸的选择性良好、灵敏性高、检测限低，可应用于细胞中的半胱氨酸的检测。

技术领域

本发明涉及半胱氨酸检测的技术领域，尤其是涉及一种基于苯并噻唑衍生物半胱氨酸的荧光探针及其制备方法。

背景技术

含有琉基的半胱氨酸作为构成蛋白质的二十种氨基酸之一，在细胞的生理过程中起着不可替代的作用。例如，半胱氨酸是细胞和组织生长的必备物质，半胱氨酸缺乏与水肿、幼儿发育不良、肝脏损伤等多种疾病相关。因此，实现细胞内半胱氨酸的荧光成像，并给出细胞内半胱氨酸表达与分布的信息，有着重要的生命科学与医学价值。

现有技术中，半胱氨酸含量测定的方法包括气相色谱一质谱联用法、高效液相色谱法、全自动的荧光偏振免疫测定、高效毛细管电泳法、有机小分子荧光探针检测法等。其中，有机小分子荧光探针检测法由于具有简单、便捷、成本低、快速、灵敏及其潜在的细胞内成像等特性，而被广泛使用。目前，已有许多有机小分子荧光探针被开发出来。专利CN103755672 A提供了一种基于香豆素的半胱氨酸荧光探针化合物，该探针的响应时间约为60分钟，响应时间较长。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于苯并噻唑衍生物半胱氨酸的荧光探针及其制备方法，荧光探针合成简单，对半胱氨酸的选择性良好、灵敏性高、检测限低，可应用于细胞中的半胱氨酸的检测。

为实现上述目的，本发明提供了一种基于苯并噻唑衍生物半胱氨酸的荧光探针，荧光探针的化学结构式如下所示：

优选的，所述荧光探针在细胞中半胱氨酸检测中的应用。

优选的，所述荧光探针在水溶液中半胱氨酸实时检测中的应用。

一种基于苯并噻唑衍生物半胱氨酸的荧光探针的制备方法，步骤如下：

S1、在无水乙醇中加入氰基联苯酚醛、邻氨基苯硫酚，然后加入双氧水、浓盐酸，室温均匀搅拌，反应结束，抽滤得淡黄色固体II；

S2、在冰浴条件下，将化合物II与丙烯酰氯溶解在干燥的二氯甲烷中，并加入三乙胺，室温搅拌过夜后，真空浓缩得到粗产物，经柱层层析得到化合物I；

优选的，步骤S1中，氰基联苯酚醛、邻氨基苯硫醇、浓盐酸和双氧水的摩尔比为1:1:3:10。

优选的，步骤S2中，化合物II、丙烯酰氯和三乙胺的摩尔比为1:4:4。

优选的，步骤S2中，反应全程在氮气的保护氛围下进行。

因此，本发明采用上述一种基于苯并噻唑衍生物半胱氨酸的荧光探针及其制备方法，其技术效果如下：

(1)荧光探针能与半胱氨酸特异性反应，增强化合物的荧光强度；

(2)荧光探针在检测半胱氨酸过程中不会受到其他氨基酸的干扰，对半胱氨酸具有良好的选择性；

(3)荧光探针能对活细胞中的半胱氨酸进行检测，成像效果好，且对细胞毒性的低。

(4)实现高效快速地检测生物体内半胱氨酸，仅3分钟即可完成半胱氨酸快速检测。

下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

附图说明

图1是化合物I的1H NMR谱图；

图2是化合物I的选择性光谱图；