[发明专利]一种用于联合检测伤寒细菌IgG和IgM的试剂条

说明书

本发明公开了一种用于联合检测伤寒细菌IgG和IgM的试剂条，包括底板，底板上方从前往后顺次粘贴有样品垫、金标垫、NC膜和吸样垫，NC膜上从前往后依次设有IgM检测线、IgG检测线和质控线，金标垫含有伤寒H抗原‑胶体金复合物、伤寒O抗原‑胶体金复合物和兔IgG抗体‑胶体金复合物，IgM检测线上包被有鼠抗人u链单抗，IgG检测线上包被有鼠抗人IgG单抗，质控线上包被有羊抗兔IgG单抗。本发明的试纸条仅需一次加样就能实现伤寒细菌IgG和IgM的联合检测，操作简单，且大大缩短了检测时间，提高检测效率、灵敏度和特异性。

技术领域

本发明涉及免疫学检测装置技术领域，特别涉及一种用于联合检测伤寒细菌IgG和IgM的试剂条。

背景技术

目前检测伤寒的方法主要是细菌培养法和肥达实验法。细菌培养法是检测伤寒细菌的金标准，但是细菌培养的周期长，检测时间需要5天以上，而且容易受到抗生素等因素的影响而导致漏检；肥达试验法中，肥达反应一般在伤寒病程第二周才出现阳性，且特异性较差、灵敏度不高，阳性率也较低。上述两种方法都存在检测时间较长、效率低下的缺陷。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种用于联合检测伤寒细菌IgG和IgM的试剂条。

本发明采用以下技术方案：

一种用于联合检测伤寒细菌IgG和IgM的试剂条，包括底板，所述底板上方从前往后顺次粘贴有样品垫、金标垫、NC膜和吸样垫，所述NC膜上从前往后依次设有IgM检测线、IgG检测线和质控线，所述金标垫含有伤寒H抗原-胶体金复合物、伤寒O抗原-胶体金复合物和兔IgG抗体-胶体金复合物，所述IgM检测线上包被有鼠抗人u链单抗，所述IgG检测线上包被有鼠抗人IgG单抗，所述质控线上包被有羊抗兔IgG单抗。

进一步地，所述底板采用聚酯板。

进一步地，所述金标垫的制备方法为：将所述伤寒H抗原-胶体金复合物、伤寒O抗原-胶体金复合物、兔IgG抗体-胶体金复合物按1:1:0.5混合后，均匀涂抹于所述NC膜上冻干3-5h。

进一步地，所述伤寒H抗原-胶体金复合物的制备方法为：按10-20μg/mL的比例往胶体金分散液中快速加入伤寒H抗原，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μL/mL的比例快速加入封闭液，反应10-30min后，离心后弃上清液得沉淀，按100μL/mL的比例往该沉淀中加入复溶液，超声复溶，获得伤寒H抗原-胶体金复合物。

进一步地，所述伤寒O抗原-胶体金复合物的制备方法为：按10-20μg/mL的比例往胶体金分散液中快速加入伤寒O抗原单抗，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μL/mL的比例快速加入封闭液，反应10-30min，离心后弃上清液得沉淀，用pH值7.4的20mmPB缓冲液复溶，按10-20μg/mL的比例加入伤寒O抗原，室温反应1小时，离心后弃上清液得沉淀，按100μL/mL的比例往该沉淀中加入复溶液，超声复溶，获得伤寒O抗原-胶体金复合物。

进一步地，所述兔IgG抗体-胶体金复合物的制备方法为：按5-15μg/mL的比例往胶体金分散液中快速加入兔IgG抗体，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μL/mL的比例快速加入封闭液，反应10-30min，离心后弃上清液得沉淀，按100μL/mL的比例往该沉淀中加入复溶液，超声复溶，制成兔IgG抗体-胶体金复合物。

进一步地，所述胶体金分散液中的胶体金颗粒大小为40-60nm、浓度为0.01-0.03wt％；所述离心的条件为：转速8000-10000rpm，时间25-30min。

进一步地，所述IgM检测线的包被方法为：将鼠抗人u链单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/mL后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。