[发明专利]一种宏基因组来源的耐热耐酸性漆酶及其编码基因在审
| 申请号: | 202210165040.6 | 申请日: | 2022-02-23 |
| 公开(公告)号: | CN114574453A | 公开(公告)日: | 2022-06-03 |
| 发明(设计)人: | 张士成;刘怡;罗刚 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
| 主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/866;C12N5/10 |
| 代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 张磊 |
| 地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 宏基 来源 耐热 耐酸 性漆酶 及其 编码 基因 | ||
1.一种宏基因组来源的耐热耐酸性漆酶,其特征在于:所述漆酶为AA1_Bin30_Lac,漆酶AA1_Bin30_Lac是具有如下(a1)或(a2)特征的蛋白质:
(a1)其氨基酸序列与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列一致;
(a2)将(a1)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的突变体,该突变体具有与SEQ ID NO.1所示的蛋白序列至少90%以上的同源性及至少90%以上的漆酶活性;
其中:SEQ ID NO.1由658个氨基酸残基组成。
2.一种如权利要求1所述的宏基因组来源的耐热耐酸性漆酶的编码基因,其特征在于:所述漆酶AA1_Bin30_Lac的编码基因从宏基因组中筛选获得;
其中,所述基因具有(b1)-(b3)中任一所述核苷酸序列:
(b1)SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列;
(b2)与(b1)互补的核苷酸序列;
(b3)与(b1)或(b2)互补所示的核苷酸序列具有≥90%一致性且编码相同功能蛋白质的核苷酸序列。
3.一种核酸构建体,其特征在于:包含与一种或多种调控序列可操作性地连接的上述编码基因,所述调控序列在合适的表达宿主中指导所述漆酶的产生。
4.一种重组表达载体,其特征在于:包含上述的核酸构建体。
5.所述的载体为原核表达载体如pET系列载体,酵母表达载体或昆虫病毒表达载体BV。
6.根据权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于: BV系列载体为Baculovirus /Insect Cells expression system。
7.一种如权利要求5所述的重组表达载体得到的宿主,其特征在于:由所述重组表达载体经转化或转染原核生物或真核生物宿主得到。
8.根据权利要求6所述的宿主,其特征在于:所述宿主为细菌、酵母或动物细胞。
9.根据权利要求1所述的一种宏基因组来源的耐热耐酸性漆酶的制备方法,其特征在于:具体步骤如下:
(1)在有助于产生漆酶的条件下培养上述宿主,其中所述宿主细胞包含SEQ ID NO.2所述核苷酸;
(2)回收上述漆酶。
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